[發(fā)明專利]一種海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同時快速檢測的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010139245.8
• 申請日: 2020-03-03
• 公開（公告）號: CN111272895B
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發(fā)明（設計）人: 王聯珠;尹大芳;孫曉杰;郭瑩瑩;江艷華;彭吉星;劉芬
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 山東三邦知識產權代理事務所(普通合伙) 37308
• 代理人: 肖太升;高洋

1.一種海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同時快速檢測的方法，其特征在于，步驟如下：

待測樣品采用超聲輔助水提醇沉的方法提取海藻多糖粗品；利用Sevage法去除提取的海藻多糖粗品中的蛋白后，采用三氟乙酸水解海藻多糖；水解完成后加入NaOH中和水解液的酸度，過0.22μm濾膜后用于離子色譜-脈沖安培檢測器檢測，利用保留時間對待測樣品中的糖類進行定性，將定性后糖類的峰面積導入該糖類對應的標準工作曲線中，計算獲得該糖類的濃度，從而實現定量分析；

所述離子色譜-脈沖安培檢測的檢測條件為：

色譜柱：Dionex CarboPac PA10，250 mm×4 mm糖分析專用柱；

Dionex CarboPac PA10，50 mm×4 mm糖保護柱；

工作電極：Gold；

參比電極：AgCl電極；

工作電位：糖標準四電位，具體如下：

流速：1.0 mL/min；

柱溫：25℃；

進樣量：25 μL；

采用多級梯度洗脫程序進行洗脫；

所述洗脫程序中的A為超純水，B為200 mM NaOH，C為500 mM NaAc；

所述離子色譜-脈沖安培檢測過程中采用多級梯度洗脫程序；具體如下：

*Curve 5是線性；上述溶液均使用電阻率為18.2 MΩ·cm 以上的超純水配制；

所述中性糖為巖藻糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、核糖和乳糖；所述氨基糖為氨基半乳糖和氨基葡萄糖；所述糖醛酸為半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。

2.根據權利要求1所述海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同時快速檢測的方法，其特征在于，所述標準工作曲線是由以下方法制備而成：

配制巖藻糖、葡萄糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、核糖、乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸的混合標準工作溶液，混合標準工作溶液濃度梯度分別為0.5 mg/L、2mg/L、5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、60 mg/L；

上述混合標準溶液分別用于離子色譜-脈沖安培檢測器檢測，以標準溶液中巖藻糖、葡萄糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、核糖、乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸的濃度為橫坐標，再以標準溶液中巖藻糖、葡萄糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、核糖、乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸在脈沖安培檢測器上的響應值的峰面積為縱坐標繪制標準工作曲線。

3.權利要求1或2所述海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同時快速檢測的方法，其特征在于，所述的海藻為海帶、紫菜、裙帶菜中的至少一種。

4.權利要求1或2所述海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同時快速檢測的方法在食品工業(yè)中糖類化合物分析檢測中的應用。