[發明專利]一種檢測丙溴磷的試紙條及方法

有效

• 申請號: 202010138495.X
• 申請日: 2020-03-03
• 公開（公告）號: CN111239399B
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發明（設計）人: 吳小勝;何方洋;凡靜靜;宋灝;張珊珊;楊海濤;鄭哲哲
• 申請（專利權）人: 北京勤邦科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558;G01N33/53
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種檢測丙溴磷的試紙條及方法。該試紙條包括樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊和底板，所述反應膜上具有包被有丙溴磷半抗原?載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線，所述結合物釋放墊上噴涂有丙溴磷單克隆抗體?膠體金標記物。本發明還提供一種應用上述試紙條檢測蔬菜、水果樣品中丙溴磷的方法。本發明提供的試紙條具有操作簡單、靈敏度高、檢測速度快、成本低、適于大批量樣本篩查等優點，能夠滿足我國食品監管部門開展現場監控和檢測工作。

技術領域

本發明涉及一種檢測丙溴磷的試紙條及方法，具體涉及一種用于檢測丙溴磷的膠體金試紙條，其特別適用于蔬菜、水果中丙溴磷殘留的檢測。

背景技術

丙溴磷(profenofos)是一種中等毒性的非內吸性廣譜有機磷殺蟲劑，具有觸殺和胃毒作用，對作物上的害蟲有很好的防治效果。但隨著使用量日漸增多，其在蔬菜上的使用而產生的污染不容忽視。雖然少量的丙溴磷殘留不會對人體造成立即的、直接的毒害，但是長期食用這種受污染的蔬菜、水果可導致癌癥、不孕癥、內分泌紊亂等疾病，還會危害神經中樞，以致痙攣而死。我國國家標準GB?2763-2019《食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量》中規定了不同食品中丙溴磷的殘留限量。

目前已報道的檢測丙溴磷的方法主要是氣相色譜法、氣相色譜-質譜法和液相色譜串聯質譜法等儀器方法。這些方法均須在實驗室條件下操作，樣品前處理繁瑣費時，還需配備昂貴的儀器設備，檢測成本較高、耗時長、操作復雜，在實際應用過程中有很大的限制性，難以滿足大量樣品和現場樣品快速檢測的需要。因此，開發一種簡單快速、適用于蔬菜水果中丙溴磷殘留的膠體金試紙條，可滿足大量樣品現場篩選和監控，能夠更好地滿足我國食品監管部門等開展檢測工作。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能夠檢測蔬菜水果中丙溴磷殘留的膠體金試紙條，并且提供一種高效、準確、簡便、適于現場監控和大量樣本篩查的檢測方法。

本發明所提供的檢測丙溴磷的試紙條，包括樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊和底板；所述反應膜上具有包被有丙溴磷半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線；所述結合物釋放墊上噴涂有丙溴磷單克隆抗體-膠體金標記物。

所述丙溴磷單克隆抗體是以丙溴磷半抗原-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得。

所述丙溴磷半抗原-載體蛋白偶聯物由丙溴磷半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白或人血清白蛋白，所述丙溴磷半抗原是以三氯硫磷為起始原料，先后與丁硫醇、乙醇、5-溴-3-氯-2-羥基苯甲酸進行縮合反應得到，其分子結構式為：

所述樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊依次粘貼在底板上，所述結合物釋放墊1/3～1/2被覆蓋于樣品吸收墊下。

所述底板可為PVC底板或其他硬質不吸水的材料；所述樣品吸收墊可為吸濾紙或濾油紙；所述結合物釋放墊可為玻璃棉或聚酯材料；所述吸水墊為吸水紙；所述反應膜可為硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜。

本發明的另一個目的是提供一種制備上述試紙條的方法，其包括步驟：

1)制備噴涂有丙溴磷單克隆抗體-膠體金標記物的結合物釋放墊；

2)制備具有包被有丙溴磷半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線的反應膜；

3)將1)和2)制備好的結合物釋放墊、反應膜與樣品吸收墊、吸水墊和底板組裝成試紙條。

具體地說，步驟包括：

1)以三氯硫磷為起始原料，先后與丁硫醇、乙醇、5-溴-3-氯-2-羥基苯甲酸進行縮合反應，制備丙溴磷半抗原；

2)將丙溴磷半抗原與載體蛋白偶聯，制備丙溴磷半抗原-載體蛋白偶聯物；