[發明專利]一種豬RSPO1基因及其應用

有效

• 申請號: 202010138109.7
• 申請日: 2020-03-03
• 公開（公告）號: CN111394357B
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發明（設計）人: 王修啟;朱秋杰;周加義;秦穎超;高春起;嚴會超
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/47;C12N15/70;A23K20/147;A23K50/30;A23K50/50;A61K48/00;A61K38/17;A61P39/02;A61P43/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

本發明公開了一種豬RSPO1基因及其應用。本發明首次克隆得到了一種豬RSPO1基因，利用該基因構建得到一種重組載體PET?32α?Rspondin 1，進而表達得到了一種重組蛋白質rpRSPO1；該重組蛋白質rpRSPO1具有生物活性，能夠顯著提高細胞活力、促進細胞增殖；還能夠有效緩解嘔吐毒素誘導的動物平均日增重下降、平均日采食量下降、單位長度空腸重量降低和腸道跨膜電阻值降低，顯著提高動物生長性能、增強腸道屏障防御功能；因此，所述豬RSPO1基因、所述蛋白質rpRSPO1或所述重組載體在制備細胞和哺乳動物生長促進劑、以及制備緩解嘔吐毒素誘導的動物腸道損傷的制劑中具有廣泛的應用前景。

技術領域

本發明屬于生物技術技術領域。更具體地，涉及一種豬RSPO1基因及其應用。

背景技術

Wnt/β-catenin信號通路在機體生長發育過程中發揮著重要的作用，其中，R-spondin 1(RSPO1)作為Wnt/β-catenin信號通路增強劑，通過有效結合膜受體E3泛素連接酶ZNRF3、RNF43以及Lgr4/5/6，抑制ZNRF3、RNF43對Wnt受體卷曲家族成員Frizzleds泛素化降解，以提高Frizzleds受體結合Wnt配體的敏感性，促進Wnt/β-catenin信號通路的激活，維持生命的正常代謝。

嘔吐毒素是最常見的一種污染飼料和食品的霉菌毒素，無論在發展中國家還是發達國家，嘔吐毒素污染問題均受到了廣泛關注。嘔吐毒素是世界上谷物污染面積較廣的一種毒素，其作用的首要靶器官是動物腸道，能抑制細胞增殖，誘導細胞凋亡，損傷腸道屏障和吸收功能，最終導致動物生長發育受阻，給畜牧業帶來巨大經濟損失。例如，有研究表明嘔吐毒素抑制Wnt/β-catenin信號通路的活性，降低腸道干細胞活性。另外，食品中的嘔吐毒素也會導致人的腸道損傷、腹瀉和嘔吐，嚴重危害人類健康。

目前，去除或降低飼料和食品的嘔吐毒素含量的方法包括物理法、化學法和生物脫毒法，以上方法均能夠降低嘔吐毒素的含量，但同時也使得營養物質的大量流失，適口性差，造成生物安全性和規模化生產等問題。因此，亟需提供一種無毒副作用、能夠大規模推廣應用的用于緩解嘔吐毒素誘導的腸道損傷的方法。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有用于促進細胞增殖和動物生長，及其緩解嘔吐毒素誘導的腸道損傷的方法的缺陷和不足，提供一種豬RSPO1基因及其應用。

本發明的目的是提供一種豬RSPO1基因。

本發明另一目的是提供所述豬RSPO1基因編碼的蛋白質rpRSPO1。

本發明又一目的是提供一種重組載體。

本發明又一目的是提供所述豬RSPO1基因、所述蛋白質rpRSPO1或所述重組載體在制備細胞生長促進劑中的應用。

本發明再一目的是提供所述豬RSPO1基因、所述蛋白質rpRSPO1或所述重組載體在制備動物促生長飼料添加劑中的應用。

本發明再一目的是提供所述豬RSPO1基因、所述蛋白質rpRSPO1或所述重組載體在制備緩解嘔吐毒素誘導的動物腸道損傷的制劑中的應用。

本發明上述目的通過以下技術方案實現：

本發明首先提供了一種豬RSPO1基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本發明還提供了所述豬RSPO1基因編碼的蛋白質rpRSPO1，其氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。

本發明還提供了一種重組載體，含有所述豬RSPO1基因。