[發明專利]一種抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中內生菌污染的方法

有效

• 申請號: 202010135995.8
• 申請日: 2020-03-02
• 公開（公告）號: CN111165357B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發明（設計）人: 王玲;付海靜;劉紅艷
• 申請（專利權）人: 東北林業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中內生菌污染的方法。該抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中內生菌污染的方法包括采用鑷子夾住出現內生菌的愈傷，在無菌濾紙上將其上的內生菌粘液蹭除，再將處理好的愈傷接種在添加了濃度為100mg/L的青霉素G鈉溶液的增殖培養基上，培養30d，將成功抑菌后的愈傷再次接入無青霉素G鈉溶液的增殖培養基中進行培養。該方法具有高效的殺菌、抑菌作用，抑制了玉蟬花愈傷組織增殖過程中的內生菌污染的現象，抑菌率達到86.67％，且愈傷健康，能夠保證玉蟬花愈傷組織正常生長，成功解決玉蟬花愈傷組織增殖過程中內生菌難以去除的瓶頸問題。

技術領域

本發明涉及植物組織培養技術領域，具體涉及到一種抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中內生菌污染的方法。

背景技術

玉蟬花(Iris ensata Thunb.)是鳶尾科，鳶尾屬多年生草本花卉，性喜水濕，宜栽于淺水當中；土壤條件較好的旱生條件下也能正常生長。每年6、7月份開花，連續花期較長；葉片青翠似劍，綠期長。其品種繁多，花型花色豐富，適應性強，是綠化、美化香化城市，裝飾花壇、花徑、花帶、路旁及草坪的優良植物材料，在園林綠化中有多種應用形式，正越來越受到人們的青睞。

專利CN102524081A公開了一種玉蟬花的組織培養方法，具體包括組織培養過程中初代培養、繼代培養、增殖培養、生根培養以及煉苗移栽的步驟，但是沒有涉及到愈傷組織增殖過程中產生的內生菌污染現象的處理方法。

目前雖然已有玉蟬花組織培養的相關研究開展，但仍存在愈傷組織增殖過程中出現透明且帶有黏性的內生菌污染的情況，針對這一問題，我們經過實驗研究，提供了一種抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中內生菌污染的方法，為玉蟬花再生體系的建立提供了幫助，對實現玉蟬花組培苗生產和優質種苗的提供具有重要現實意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中內生菌污染的方法，其減少了內生菌在玉蟬花愈傷組織增殖過程中的污染問題，愈傷組織的抑菌率高、增殖率高。

為實現上述目的,在本發明的一個實施方案中,本發明提供了一種抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中內生菌污染的方法，該方法包括：用鑷子夾住出現內生菌的愈傷，在無菌濾紙上將其上的內生菌粘液蹭除，再將處理好的愈傷接種在添加了100mg/L青霉素G鈉溶液的增殖培養基上，培養30d，將成功抑菌后的愈傷再次接入無青霉素G鈉溶液的增殖培養基中進行培養；

在本發明的一個優選實施方案中,本發明提供了一種抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中的內生菌污染的方法，所述所述100mg/L青霉素G鈉溶液的配制方法包括：稱取100mg的粉狀青霉素G鈉，溶于無菌水中，最后定容至1L,制得濃度為100mg/L的青霉素G鈉溶液；

在本發明的一個優選實施方案中,本發明提供了一種抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中的內生菌污染的方法，所述固體增殖培養基包括：MS+0.2mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+3.5g/L瓊脂，培養基的pH值均調節至5.8～6.0；

在本發明的一個優選實施方案中，本發明提供了一種抑制玉蟬花愈傷組織增殖過程中的內生菌污染的方法，所述培養條件包括：培養室的培養溫度為25±1℃、光照時間為14h/d、光照強度為25μmol/ (m².s)。

附圖說明

圖1不同的抑菌劑抑制愈傷內生菌的效果。

具體實施方式

下面對本發明的技術方案作進一步進行詳細描述，但應當理解本發明的保護范圍并不受具體實施方式的限制。

下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。

下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。

實施1：青霉素G鈉對玉蟬花愈傷組織的影響。