[發明專利]基于組織培養技術繁育草海桐種苗的方法

在審

• 申請號: 202010134430.8
• 申請日: 2020-02-28
• 公開（公告）號: CN111316911A
• 公開（公告）日: 2020-06-23
• 發明（設計）人: 陳粵超;張穎;許方宏;郭欣
• 申請（專利權）人: 廣東湛江紅樹林國家級自然保護區管理局
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 張艷美;王志

本發明公開了一種基于組織培養技術繁育草海桐種苗的方法，其步驟包括：優良單株選擇、外植體選取及準備、誘導培養、增殖培養、生根培養、煉苗移栽，本發明中通過對外植體的合理選取、誘導培養基和誘導培養條件的控制、增殖培養基和增殖培養條件的控制、生根培養基和生根培養條件的控制，培養得到草海桐種苗，該方法能夠在短期內提供大量與母本性狀一致的優良草海桐種苗，這解決了現有技術中扦插繁殖和種子繁殖的繁殖率低的問題。

技術領域

本發明屬于植物繁育技術領域，具體涉及一種基于組織培養技術繁育草海桐種苗的方法。

背景技術

草海桐(scaevola sericea)又稱羊角樹、水草仔、細葉水草，屬于草海桐科多年生常綠亞灌木植物。草海桐性喜高溫、潮濕和陽光充足的環境，耐鹽性佳、抗強風、耐旱、耐寒，抗污染及病蟲危害能力強，生長速度快，因此可作為海島與海岸帶防風固沙植被的備選樹種。另外，經過研發發現草海桐還含有多種次生代謝產物，具有重要的藥用價值，可治療白內障、胃病、鱗狀皮膚癬、刀傷及動物咬傷，并有改善眼部疼痛的功能。

由于人類對生態環境和自然資源保護意識的不夠使該種植物的自然資源十分有限。目前草海桐的主要繁殖方式是種子繁殖和扦插繁殖，但是草海桐由于種子不好收集，發芽率低導致繁殖率低，同時由于種子遺傳的不穩定難使后代保有原有品種的優良性狀，而扦插繁殖受到草海桐母株來源的限制，繁殖效率低，難以進行規模化生產。隨著生物技術的發展，一種專門用于植物種苗快速繁殖的組織培養技術開始出現，組織培養技術具有繁殖快、周期短、且能在短期內提供大量與母本性狀一致的優良種苗用于生產的特點，因而有望成為提供草海桐種源的新方法，然而目前關于草海桐的組織培養尚未有成熟的報道。

因此，亟需提供一種基于組織培養技術繁育草海桐種苗的方法，以解決現有技術的不足。

發明內容

本發明的目的是提供一種基于組織培養技術繁育草海桐種苗的方法，該方法具有繁殖快、周期短、且能在短期內提供大量與母本性狀一致的優良草海桐種苗的優點。

為實現以上目的，本發明提供了一種基于組織培養技術繁育草海桐種苗的方法，包括如下步驟：

(1)優良單株選擇，從草海桐中選擇高抗鹽堿、株型茁壯漂亮的植株作為優良單株；

(2)外植體選取及準備，從優良單株上選取幼嫩的葉片作為外植體，將選取的外植體依次進行清洗、消毒后吸干水分，備用；

(3)誘導培養，將消毒好的外植體接入到誘導培養基中培養得到愈傷組織，誘導培養基為MS培養基中添加0.3-0.7mg/L 2,4-D、30g/L蔗糖及7g/L瓊脂所得；

(4)增殖培養，將誘導培養獲得的愈傷組織接入到芽分化培養基中培養得到再生苗，芽分化培養基為MS培養基中添加0.8-1.2mg/L6BA、0.1-0.3mg/LNAA、30g/L蔗糖及7g/L瓊脂所得；

(5)生根培養，將增殖培養得到的再生苗轉到生根培養基中后獲得生根再生苗，生根培養基為1/2MS培養基中添加0.2-0.8mg/LNAA、10g/L蔗糖、1g/L花寶2號及7g/L瓊脂所得；

(6)煉苗移栽，將生根再生苗放置在大棚里煉苗后，移栽到營養土與耶糠體積比為1:1的移栽基質中生長，即得草海桐種苗。

與現有技術相比，本發明以優良單株的幼嫩葉為外植體，通過外植體的消毒準備、誘導培養、增殖培養、生根培養、煉苗移栽等過程建立了快速繁育草海桐種苗的方法，該方法能夠在短期內提供大量與母本性狀一致的優良草海桐種苗，這解決了現有技術中扦插繁殖和種子繁殖的繁殖率低的問題，同時繁育出遺傳背景一致的草海桐種苗，還解決了現有技術中種子繁育雜合后代的問題，又能為草海桐的遺傳轉化提供基礎，同時該方法繁殖快、周期短、成本低，這為草海桐良種繁育與推廣應用提供了技術保障。

較佳地，本發明的步驟(2)中進行清洗、消毒的方法進一步包括如下步驟：