[發明專利]可溶性PD-L2作為SLE生物標志物的應用

在審

• 申請號: 202010127648.0
• 申請日: 2020-02-28
• 公開（公告）號: CN111337685A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 孫靜
• 申請（專利權）人: 蘇州衛生職業技術學院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 尹紅紅

本發明公開了可溶性PD?L2作為SLE生物標志物的應用，具體公開了可溶性PD?L2作為SLE生物標志物在制備SLE診療評估試劑中的應用，所述診療評估試劑的檢測樣本為血清。同時公開了一種試劑組在制備SLE診療評估試劑中的應用，所述的試劑組包括可溶性PD?L2檢測試劑和補體C3、C4檢測試劑，可溶性PD?L2水平與補體C3、C4水平呈正相關。采用本發明的檢測試劑盒對血清樣本中可溶性PD?L2以及補體C3、C4聯合檢測，可有效用于SLE疾病的早期診斷、預后評估，為SLE疾病的診療提供了一種新的途徑，具有良好的臨床應用前景。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，具體涉及可溶性PD-L2(sPD-L2)作為SLE生物標志物的應用。

背景技術

SLE是一種風濕性自身免疫性疾病，臨床表現可累及全身各個器官、組織，為全身性、彌漫性疾病。SLE好發于年輕女性，常為20-40歲的育齡期女性。在SLE發病機制中，自身免疫耐受損害、淋巴細胞過度活化所導致的自身抗體的產生和炎癥細胞浸潤是其主要的病理損傷機制。在SLE的免疫病理過程中，B7/CD28家族分子信號通路發揮著重要作用，其不僅可通過提供正性共刺激信號來啟動、增強、維持T、B淋巴細胞介導的免疫應答，還可以通過提供負性共刺激信號來限制、減弱或者終止免疫反應。

PD-1/PD-L信號通路作為負性調節因子在維持T細胞免疫應答耐受中有很重要作用。有研究報道發現PD-1缺乏的C57BL/6小鼠出現狼瘡樣自身免疫性增生性關節炎和腎小球腎炎，并伴有腎小球上IgG3和C3補體的沉積。PD-L2作為PD-1的受體之一，僅表達于活化的單核巨噬細胞及專職的抗原遞逞細胞中如樹突狀細胞，有關PD-L2在自身免疫病特別是在SLE中的病理機制研究甚少。前期我們通過流式細胞術分析發現SLE患者外周血單核細胞上PD-L2分子相對于健康人群顯著高表達，正同其它研究者報道PD-1和/或PD-1配體在其他人類自身免疫性疾病中的表達也有所增加。Kobayashi等發現干燥綜合征患者唾液淋巴細胞PD-1和唾液腺導管及腺泡上皮細胞PD-L1表達增強。同時Liu等報道PD-1及PD-L1分別在SLE患者CD3+T細胞及CD14+單核細胞上高表達，這可能是T細胞過度活化后的免疫調控，也有可能是與其它受體(并非PD-1)相結合傳遞正向刺激信號。

多種共刺激分子能分別以細胞膜型和可溶型兩種形式存在，包括CD28、CTLA-4、CD80、CD86、ICOSL、B7-H3和B7-H4等。可溶性形式可以通過蛋白水解酶裂解細胞上的膜型分子從而脫落形成，也可由專一的mRNA直接編碼產生。可溶性的共刺激分子在免疫調節網絡中具有十分重要的作用，有些可溶性共刺激分子如sCTLA-4可干擾CD80/CD86與膜型CTLA-4的結合，阻斷CTLA-4的抑制性作用，可有助有活化T細胞，上調免疫應答，因此在多種自身免疫性疾病中sCTLA-4已被發現高表達；而有些可溶性共刺激分子的功能如同其膜型分子相一致可激活相應的配體或受體，如soluble ICOS可以激活配體B7h，具有上調免疫應答的功能。可溶性共刺激分子在疾病的早期診斷及病情監測中有重要作用。有研究報道共刺激分子的可溶性形式在SLE患者血清中分泌發生改變，如可溶性CD28分泌上升，ICOSL分泌下降，sPD-L1分泌水平上調。

SLE臨床表現復雜多樣，病情反復多變，早期診斷困難，因此迫切需要尋求一種新型、特異性及敏感性較高的生物標志物用于SLE的診斷和預后評估。現有技術公開了外周血單核細胞上PD-L2分子在SLE患者中表達水平的變化，但并未證明sPD-L2是否能作為有效的生物標志物用于SLE疾病早期診斷的指標及疾病治療的靶點。目前尚未見以血清sPD-L2水平作為SLE疾病生物標志物的相關報道。

發明內容

本發明的目的在于研究sPD-L2在SLE患者中的異常表達情況及其可能的臨床意義，本研究收集SLE患者外周血血清，分析sPD-L2的表達情況及與臨床病例資料、各項檢驗參數間的相關性，探討sPD-L2是否能成為SLE疾病早期診斷的指標及疾病監測治療的靶點。

為了實現上述目的，本發明提供以下技術方案：