[發(fā)明專利]多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片及三維細(xì)胞球的培養(yǎng)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010127292.0
• 申請(qǐng)日: 2020-02-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111172035A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張樂(lè)帥;郭浩翔;夏亞男;蔣添燕;劉赟;王楊云;趙林鋒;王建平;黃修海
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12M3/00
• 分類(lèi)號(hào): C12M3/00;C12M1/22;C12M1/00;C12N5/00
• 代理公司: 蘇州謹(jǐn)和知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 32295
• 代理人: 唐靜芳

1.一種多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片，用以放置在細(xì)胞培養(yǎng)用具內(nèi)，其特征在于，所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片包括培養(yǎng)片本體及若干個(gè)自所述培養(yǎng)片本體的表面向內(nèi)凹陷形成的凹面。

2.如權(quán)利要求1所述的多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片，其特征在于，所述凹面具有凹面末端，所述凹面末端的橫截面的形狀為弧形或矩形或錐形。

3.如權(quán)利要求2所述的多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片，其特征在于，所述凹面末端的直徑范圍為0.4-5mm，所述凹面末端的深度范圍為0.2-2.5mm。

4.如權(quán)利要求2所述的多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片，其特征在于，所述凹面還包括用以增加所述凹面深度的柱狀空腔或錐狀空腔，于多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片的高度方向上，所述凹面末端位于所述柱狀空腔或錐狀空腔的下方且與所述柱狀空腔或錐狀空腔連接。

5.如權(quán)利要求4所述的多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片，其特征在于，所述柱狀空腔或錐狀空腔的深度范圍為0-2mm。

6.如權(quán)利要求1所述的多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片，其特征在于，所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片一體注塑形成，所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片的光滑度為納米級(jí)。

7.一種三維細(xì)胞球的培養(yǎng)方法，其特征在于，采用如權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片，所述方法包括：

將多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片放置于細(xì)胞培養(yǎng)用具內(nèi)；

向細(xì)胞培養(yǎng)用具內(nèi)加入乙醇溶液，以對(duì)所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片進(jìn)行浸潤(rùn)及滅菌處理；

吸去乙醇溶液后加入磷酸緩沖液，并重復(fù)此操作一次；

加入細(xì)胞培養(yǎng)基以使得細(xì)胞培養(yǎng)基浸潤(rùn)所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片；

向細(xì)胞培養(yǎng)用具內(nèi)加入細(xì)胞懸液，細(xì)胞在重力作用下沉降在凹面內(nèi)以形成細(xì)胞球。

8.如權(quán)利要求7所述的三維細(xì)胞球的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述“向細(xì)胞培養(yǎng)用具內(nèi)加入乙醇溶液，以對(duì)所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片進(jìn)行浸潤(rùn)及滅菌處理”具體為：

向細(xì)胞培養(yǎng)用具內(nèi)加入乙醇溶液，使得乙醇溶液沒(méi)過(guò)所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片，并保持15分鐘，使得乙醇溶液對(duì)所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片浸潤(rùn)和滅菌。

9.如權(quán)利要求7所述的三維細(xì)胞球的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述乙醇溶液的濃度范圍為75％-100％，所述乙醇溶液的體積范圍為0.2ml-2ml。

10.如權(quán)利要求7所述的三維細(xì)胞球的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述“加入細(xì)胞培養(yǎng)基以使得細(xì)胞培養(yǎng)基浸潤(rùn)所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片”具體為：

加入細(xì)胞培養(yǎng)基以浸沒(méi)所述多凹面細(xì)胞培養(yǎng)片，并預(yù)留0.2-2ml的細(xì)胞培養(yǎng)基。