[發明專利]SARS-CoV-2的重組RBD蛋白及其制備方法有效
| 申請號： | 202010126715.7 | 申請日： | 2020-02-28 |
| 公開（公告）號： | CN113321713B | 公開（公告）日： | 2022-11-01 |
| 發明（設計）人： | 林曉濤;阮秋蓮;邢智浩;錢純亙;胡鹍輝 | 申請（專利權）人： | 深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/165 | 分類號： | C07K14/165;C12N15/50;C12P21/02;G01N33/569 |
| 代理公司： | 華進聯合專利商標代理有限公司 44224 | 代理人： | 潘艷麗 |
| 地址： | 518116 廣東省深圳市龍*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | sars cov 重組 rbd 蛋白 及其 制備 方法 | ||
1.SARS-CoV-2的重組RBD蛋白，其從N端到C端依次由信號肽序列、SEQ ID NO：1所示的RBD蛋白序列、SEQ ID NO：2所示的跨膜結構域序列以及SEQ ID NO：3所示的標簽序列組成；
所述信號肽序列的序列如SEQ ID NO：4所示。
2.核酸分子，其能夠表達權利要求1所述的重組RBD蛋白。
3.根據權利要求2所述的核酸分子，所述核酸分子的序列如SEQ ID NO：5所示。
4.載體，其含有權利要求2或3所述的核酸分子。
5.宿主細胞，其基因組中摻有2或3所述的核酸分子，所述宿主細胞為原核細胞。
6.權利要求1所述的SARS-CoV-2的RBD蛋白的制備方法，包括：
a）在適宜的條件下培養權利要求5所述的宿主細胞，收集培養液和/或所述宿主細胞的裂解液；
b）利用權利要求1的所述標簽序列特異性的配體從a）所得組分中分離RBD蛋白。
7.根據權利要求6所述的制備方法，所述標簽序列特異性的配體為抗體。
8.權利要求1所述的SARS-CoV-2的RBD蛋白的制備方法，包括：
a）在適宜的條件下培養權利要求5所述的宿主細胞，收集所述宿主細胞；
b）將所述宿主細胞與膜蛋白解離試劑共孵育；
c）將孵育液固液分離，收集上清中的RBD蛋白。
9.根據權利要求8所述的制備方法，所述膜蛋白解離試劑的主要活性成分包括0.7%~1.3% 的Triton X-100。
10.根據權利要求9所述的制備方法，所述膜蛋白解離試劑中含有7mM~13mM Na2HPO4和40 mM ~50mM NaCl，pH=7.2~7.6。
11.根據權利要求8所述的制備方法，所述固液分離的方法為離心。
12.組合物，其由權利要求6~11任一項方法制備得到。
13.用于檢測抗SARS-CoV-2的RBD蛋白抗體的試劑或試劑盒，其含有權利要求1所述的重組RBD蛋白或權利要求12所述的組合物。
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