[發明專利]利用柑橘皮制備木糖醇的方法

在審

• 申請號: 202010123615.9
• 申請日: 2020-02-27
• 公開（公告）號: CN111440829A
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發明（設計）人: 楊勝利;王逸峰;張慧;陳雪松;季小康;孔瀟慧
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12P7/18
• 分類號: C12P7/18;C12N1/16;C12R1/74
• 代理公司: 杭州斯可睿專利事務所有限公司 33241
• 代理人: 王利強

1.一種利用柑橘皮制備木糖醇的方法，其特征在于，所述方法按如下步驟進行：

(1)水解：將原料柑橘皮洗凈，烘干后破碎，置于水解釜中，加入原料柑橘皮質量3～5倍的水，煮沸90～120min，排水后再加入原料柑橘皮質量5～6倍的0.5wt％～1wt％硫酸，即0.5wt％～1wt％硫酸水溶液，在115～130℃，0.1～0.15MPa的條件下水解3～5h，得到水解液；

(2)中和：將步驟(1)所得水解液升溫至75～80℃，邊攪拌邊加入CaCO₃乳液進行中和，中和至pH為3.5～4.0后，保溫60～90min，過濾除渣，得到糖液；

(3)脫色：將步驟(2)所得糖液減壓濃縮至所述糖液體積的1/5～1/8倍，濾除析出的固體，升溫至75～80℃，pH調為2.5～3.5，邊攪拌邊加入活性炭進行脫色，脫色后濾除活性炭，得到脫色后的糖液；

(4)離子交換：對步驟(3)所得脫色后的糖液進行離子交換，采用001*7型強酸性陽離子樹脂和D296R或者D201型強堿多孔陰離子樹脂進行交叉處理，所述交叉處理的方法為：先用所述陽離子樹脂對脫色后的糖液進行離子交換，再用所述陰離子樹脂進行離子交換，以此為一個周期，重復進行2～3次，得到離子交換后的糖液；

(5)發酵：首先配制培養基：將步驟(4)所得離子交換后的糖液、酵母提取物、牛肉膏、蛋白胨、水混合即得到培養基，接入以熱帶假絲酵母Candida tripicalis，保藏號：AS2.1776為出發菌株制得的酶源，在200～220r/min，28～32℃的條件下發酵46～52h，得到發酵液，然后將所得發酵液在8000～10000rpm下離心20～25分鐘，取上清液，純化得抽提液冷卻后析出晶體，過濾收集晶體并干燥，得到產物木糖醇；所述培養基中，所述糖液中的木糖的終濃度為120～150g/L，所述酵母提取物、牛肉膏、蛋白胨的終濃度分別為8～12g/L，溶劑為水，初始pH為5.0～6.0。

2.如權利要求1所述的利用柑橘皮制備木糖醇的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，將所述柑橘皮烘干后破碎至粒度為2～5mm。

3.如權利要求1或2所述的利用柑橘皮制備木糖醇的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，加入CaCO₃乳液進行中和，所述CaCO₃乳液波美度為15～17度。

4.如權利要求1或2所述的利用柑橘皮制備木糖醇的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，所述活性炭的質量用量以所述糖液的體積計為100～160g/L，脫色后所述糖液的透明度為30％～40％。

5.如權利要求1或2所述的利用柑橘皮制備木糖醇的方法，其特征在于，所述步驟(4)中，通過離子交換處理進一步凈化所述糖液，使所述糖液的透明度達93％～97％，糖液呈無色透明狀。

6.如權利要求1或2所述的利用柑橘皮制備木糖醇的方法，其特征在于，所述步驟(5)中，在配制培養基前，通過紫外可見分光光度法測得所述糖液中木糖的含量，從而在配制培養基時，通過調節水量使木糖的終濃度滿足所需濃度范圍。

7.如權利要求1或2所述的利用柑橘皮制備木糖醇的方法，其特征在于，所述步驟(5)中所述的純化方法為：所述上清液，加入活性炭，調節pH至4.8～5.2，煮沸，冷卻至室溫，抽濾，取濾液在50～60℃下減壓蒸干得到固體物質，并在50～60℃下用無水乙醇抽提得抽提液；所述活性炭的質量用量以所述上清液的體積計為18～25g/L。

8.如權利要求1或2所述的利用柑橘皮制備木糖醇的方法，其特征在于，所述步驟(5)中，所述的出發菌株熱帶假絲酵母(Candida tripicalis，菌種保存號：AS2.1776)，購自中國普通微生物菌種保藏中心(北京)。