[發明專利]抗HPV59L1的單克隆中和抗體及其應用

有效

• 申請號: 202010122286.6
• 申請日: 2020-02-26
• 公開（公告）號: CN111205365B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發明（設計）人: 鄒國寶;魏穎穎;郭光華;藺皓;劉欣欣;宋高尚;沈江衛
• 申請（專利權）人: 中生方政生物技術股份有限公司;北京中生方政生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/08
• 分類號: C07K16/08;C12N15/13;G01N33/577;G01N33/569;A61K39/42;A61P35/00;A61P17/12;A61P31/20
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 溫可睿

本發明涉及抗體藥物技術領域，尤其涉及抗HPV59L1的單克隆中和抗體及其應用。本發明提供了HPV59的特異性的單克隆中和抗體以及產生該抗體的雜交瘤細胞系，利用其中的一株中和活性效價最高的單克隆中和抗體，采用間接ELISA法、雙抗夾心ELISA法、免疫雜交法等，可廣泛應用于臨床樣本中HPV59病毒的感染檢測；利用其中的一株中和活性效價最高的單克隆中和抗體，制備成陰道凝膠、陰道清洗液、外用洗液、陰道栓劑、凍干粉、陰道泡騰片等，用于HPV59感染患者的治療，能有效提高HPV59患者的臨床轉陰率。本發明對女性的健康發展和公共衛生防控均具有重要的意義。

技術領域

本發明涉及抗體藥物技術領域，尤其涉及抗HPV59L1的單克隆中和抗體及其應用。

背景技術

人類乳頭瘤病毒(Human Papillomavims，簡稱HPV)是球形、雙鏈DNA病毒，病毒顆粒直徑為55～60nm，核衣殼呈20面體對稱，由72個主要衣殼蛋白L1的五聚體及次要衣殼蛋白L2組成。主要侵及人的上皮組織和細胞，能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖，進而誘發各種良、惡性增生病變。高危型HPV感染與多種惡性腫瘤的發生相關，低危型的HPV感染則引起肛門和生殖器疣。

高危型HPV包括16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82等，可導致宮頸上皮內瘤樣病變(CIN)和宮頸癌的發生，其中HPV16、HPV18作為最常見的致癌型別，其單克隆抗體研究的比較多，如中國發明專利：一種抗HPV16 L1蛋白的單克隆抗體、其制備方法和應用(公開號CN105367652B)、一種可特異性識別HPV18 L1蛋白的單克隆抗體及其應用(公開號CN108276491A)。

加納256例確診宮頸癌病例，其中230例(89.8％)檢出HPV陽性，其中HPV18(47.4％)，HPV59(42.2％)，HPV45(37.4％)，HPV16(9.0％)是檢出比例最高的4種型別；墨西哥米卻肯州HPV檢出率為8.51％，最常見的單型別感染為HPV59、HPV51和HPV45，最常見的雙型別感染為52-53，51-59，61-67，66-11，16-62，53-62，59-CP6108，45-66，45-51，最常見的三型別感染為6-31-39，51-59-62，51-62-81，54-55-59，16-58-71和16-59-62。

瑞典四價疫苗(HPV16/18/6/11)接種10年的統計結果表明，接種型別發病率有明顯降低，2017-2018年HPV16發病率，從2008-2010的34.7％下降到16.7％，而不在接種范圍的HPV39，51，52，56，59，發生率卻有提高趨勢；同樣結論在多篇文獻中有報道。2018年4月，九價HPV疫苗在我國被批準有條件上市，包括9種高危型HPV型別，HPV6/11/16/18/31/33/45/52/58，有理由推斷，隨著疫苗的接種，這9種高危型別的發生率會有所降低，而不在此范圍的其他高危型別的發病率可能有進一步升高的趨勢，因此提前研制相應抗體，用于HPV59病毒的檢測、HPV59病毒的治療，具有重要意義。

發明內容

有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供抗HPV59L1的單克隆中和抗體及其應用，該單克隆中和抗體可廣泛應用于臨床樣本中HPV59病毒的感染檢測，且能夠用于HPV59感染患者的治療。

本發明提供的單克隆抗體，

其重鏈的CDR區中至少一個的氨基酸序列具有如SEQ ID NO：1、2或3所示的氨基酸序列或者與其具有至少80％序列同一性的序列；

其輕鏈的CDR區中至少一個的氨基酸序列具有如SEQ ID NO：4、5或6所示的氨基酸序列或者與其具有至少80％序列同一性的序列。

本發明中，所述重鏈包含三個CDR區，所述CDR區的氨基酸序列分別具有如SEQ IDNO：1、2和3所示的氨基酸序列；