[發明專利]一種從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法

在審

• 申請號: 202010119417.5
• 申請日: 2020-02-26
• 公開（公告）號: CN111153986A
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發明（設計）人: 楊娟;馮曉燕;曾曉房;白衛東;趙文紅;董浩;劉巧瑜;于立梅
• 申請（專利權）人: 仲愷農業工程學院
• 主分類號: C07K14/79
• 分類號: C07K14/79;C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 佛山幫專知識產權代理事務所(普通合伙) 44387
• 代理人: 喻振興

1.一種從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法，其特征在于，包含如下步驟：

(1)從鴿蛋中分離蛋清液，然后將蛋清液稀釋后充分攪拌，經離心過濾后取上清液；

(2)接著在上清液中加入FeCl₃·6H₂O、碳酸氫鈉以及氯化鈉繼續充分攪拌；

(3)再向上清液中加入乙醇，使得溶液中乙醇體積濃度達到40～45％，攪拌均勻后經靜置、離心得沉淀1和濾液；

(4)在濾液中繼續加入乙醇，使得濾液中乙醇體積濃度達到55～65％，攪拌均勻后經靜置、離心得沉淀2。

(5)將沉淀1和沉淀2合并，用乙醇洗滌后，加水復溶，然后與樹脂混合攪拌，再經抽濾、透析、凍干后，得所述的卵轉鐵蛋白。

2.根據權利要求1所述的從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的將蛋清液稀釋是指將蛋清液用水稀釋；水的質量用量為蛋清液質量的1.5～3倍；最優選地，水的質量用量為蛋清液質量的2倍。

3.根據權利要求1所述的從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法，其特征在于，步驟(1)中的攪拌采用磁力攪拌；攪拌時間為50～70min；最優選地，驟(1)中的攪拌采用磁力攪拌；攪拌時間為60min。

4.根據權利要求1所述的從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法，其特征在于，步驟(1)中的離心是指在3～5℃下進行離心，離心轉速為5500～6500r/min，離心時間為15～25min；最優選地，步驟(1)中的離心是指在4℃下進行離心，離心轉速為6000r/min，離心時間為20min。

5.根據權利要求1所述的從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法，其特征在于，步驟(2)中FeCl₃·6H₂O、碳酸氫鈉以及氯化鈉的質量用量與蛋清液的質量用量比為3～3.5：2.1～2.6：5～6：200；最優選地，步驟(2)中FeCl₃·6H₂O、碳酸氫鈉以及氯化鈉的質量用量與蛋清液的質量用量比為3.24：2.52：5.256：200。

6.根據權利要求1所述的從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法，其特征在于，步驟(2)中攪拌采用磁力攪拌；攪拌時間為100～150min；最優選地，步驟(2)中攪拌采用磁力攪拌；攪拌時間為120min。

7.根據權利要求1所述的從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法，其特征在于，步驟(3)中的乙醇體積濃度達到43％。

8.根據權利要求1所述的從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法，其特征在于，步驟(4)中的乙醇體積濃度達到59％。

9.根據權利要求1所述的從鴿蛋中提取卵轉鐵蛋白的方法，其特征在于，將步驟(5)得到的卵轉鐵蛋白進一步進行超濾，得到純度更高的卵轉鐵蛋白；所述的超濾采用直徑50mm，0.45μm的濾膜；超濾溫度為25℃，壓力為5psi。

10.權利要求1～9任一項所述的方法制備得到的卵轉鐵蛋白。