[發明專利]一種獲得13

有效

• 申請號: 202010118680.2
• 申請日: 2020-02-25
• 公開（公告）號: CN111320158B
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發明（設計）人: 盧偉偉;張芳超;查全智
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: C01B32/05
• 分類號: C01B32/05;G01N1/28;G01N27/62
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 蘇秋麗;邱興天

1.一種¹³C和¹⁵N雙標記植物在制備生物質炭中的應用，其特征在于，具體包括以下步驟：

（1）去除水稻衰老枯黃的葉片，采用霧化瓶噴施¹⁵N標記的濃度為2g/L尿素溶液，¹⁵N 的豐度為10%；其中尿素溶液中加入體積濃度為0.05%的曲拉通TritonX-100；噴施完成后，期間不澆水，直接進入步驟（2）；

（2）將盆栽水稻置于有機玻璃箱，標記時先用黑布遮住整個有機玻璃箱，鹽酸與一份Ba¹³CO₃反應產生¹³CO₂氣體，5 min后，將黑布打開，水稻在有機玻璃箱內進行光合作用45min后完成第1次脈沖標記；向另一份Ba¹³CO₃中添加鹽酸，完成第2次¹³C的脈沖標記；然后分別向兩份Ba¹²CO₃中添加鹽酸，產生¹²CO₂供水稻吸收利用；每份Ba¹³CO₃或Ba¹²CO₃質量均為2.65 g，¹³C豐度為98%；每份鹽酸為200 mL，濃度為2 mol/L；

（3）標記結束后，取下有機玻璃箱，通風，完成標記過程；

（4）將收獲的水稻洗凈后，放入105 °C烘箱殺青30 min，接著放入70 °C烘箱中烘至恒重；烘干后取出水稻，冷卻，密封保存；取水稻各器官的等量樣品，充分磨碎使其顆粒度達0.149 mm，混勻，使用穩定性同位素比例質譜儀對水稻樣品的¹³C和¹⁵N豐度進行測定；測定結束后進入步驟（5）；

（5）將混勻的雙標記水稻植株放入坩堝，保證內部無空隙；用鋁箔將坩堝密封，隔絕空氣；將密封好后的坩堝放入馬弗爐，目標溫度設置為300 °C和500 °C，升溫程序設置為10 °C/min，達到目標溫度后持續4 h；關閉馬弗爐，冷卻至室溫，取出坩堝，收集所制備的生物質炭。