[發(fā)明專利]雜交瘤細胞株2H3及其產(chǎn)生的抗體和應用

在審

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• 申請日: 2020-02-25
• 公開（公告）號: CN111424019A
• 公開（公告）日: 2020-07-17
• 發(fā)明（設計）人: 程華;武向麗;孫勁沖;閆靜輝
• 申請（專利權）人: 河北省科學院生物研究所
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/40;G01N33/573;G01N33/577
• 代理公司: 石家莊國為知識產(chǎn)權事務所 13120
• 代理人: 陳曉彥

本發(fā)明涉及單抗制備技術領域，具體公開一種雜交瘤細胞株2H3及其產(chǎn)生的抗體和應用。所述雜交瘤細胞株2H3的保藏號為CTCC NO:C2019217，其分泌的單克隆抗體可用于制備CK?MB蛋白檢測試劑和急性心肌梗死早期診斷試劑。本發(fā)明提供的雜交瘤細胞株2H3分泌的單克隆抗體與CK?MB蛋白的結合具有靈敏度高、特異性好的優(yōu)點。

技術領域

本發(fā)明涉及單抗制備技術領域，尤其涉及一種雜交瘤細胞株2H3及其產(chǎn)生的抗體和應用。

背景技術

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)是冠狀動脈急性、持續(xù)性缺血缺氧所引起的心肌壞死，臨床上多表現(xiàn)為劇烈而持久的胸骨后疼痛，休息及硝酸酯類藥物不能完全緩解，伴有血清心肌酶活性增高及進行性心電圖變化，可并發(fā)心律失常、休克或心力衰竭，常可危及生命。中國近年來每年此病新增至少50萬，現(xiàn)有患者至少200萬。

心肌損傷標志物中的肌酸激酶MB同工酶(creatine kinase MB，CK-MB)的濃度被視為診斷急性心肌梗死較敏感的指標之一。CK為二聚體酶由M、B兩個亞基兩兩組成，包括腦型(BB，主要存在于腦細胞)、肌肉型(MM)、雜化型(MB，主要存在于心肌細胞)和線粒體型(MiMi)4種，CK-MM和CK-BB的存在均影響CK-MB濃度檢測的準確性。

現(xiàn)有技術中用于診斷急性心肌梗死的方法包括：(1)心電圖特征性改變，新出現(xiàn)Q波及ST段抬高和ST-T動態(tài)演變；(2)心肌損傷標志物升高，肌酸激酶同工酶(CK-MB)可于發(fā)病3-6小時開始增高，于3-4d恢復正常；(3)其他血象檢測，白細胞數(shù)增多，中性粒細胞數(shù)增多，嗜酸性粒細胞數(shù)減少或消失，血沉加快，血清肌凝蛋白輕鏈增高。關于心電圖特征性改變的診斷方法，由于國內、國外缺乏較大樣本的臨床對照研究，目前各個權威機構推薦的急性心肌梗死的心電圖診斷標準的靈敏度和特異性尚不清楚，沒有統(tǒng)一標準，限制了其應用；用于診斷急性心肌梗死的心肌損傷標志物的檢測特異性、準確性均不盡人意；通過血象檢測診斷急性心肌梗死不能體現(xiàn)早期診斷的理念。基于現(xiàn)有技術中檢測急性心肌梗死的手段的局限性，尋找一種靈敏性和準確性高的用于急性心肌梗死早期診斷的方法是亟待解決的問題。

發(fā)明內容

針對現(xiàn)有通過檢測血清蛋白標志物來診斷急性心肌梗死的方法存在誤差大、準確度低的問題，本發(fā)明提供一種雜交瘤細胞株2H3及其產(chǎn)生的抗體和應用。

為達到上述發(fā)明目的，本發(fā)明實施例采用了如下的技術方案：

一種雜交瘤細胞株2H3，所述雜交瘤細胞株2H3的保藏號為CTCC NO:C2019217，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址是武漢市武昌珞珈山武漢大學，保藏時間是2019年10月14日，命名為抗CKMB的雜交瘤細胞株2H3。

相對于現(xiàn)有技術，本發(fā)明提供的雜交瘤細胞株2H3進行擴大培養(yǎng)后，其產(chǎn)生的單克隆抗體為IgG3型，抗體效價高。雜交瘤細胞株2H3產(chǎn)生的單克隆抗體的對CK-MB蛋白結合的靈敏度高、特異型好，存在多種急性心肌梗死的指標蛋白(CK-MB、CK-MM和CK-BB)的情況下，雜交瘤細胞株2H3產(chǎn)生的單克隆抗體可特異性的結合CK-MB蛋白，提高檢測結果的準確性。

本發(fā)明還提供所述雜交瘤細胞株2H3分泌的單克隆抗體。

本發(fā)明還提供所述單克隆抗體在制備CK-MB蛋白檢測試劑中的應用。

本發(fā)明還提供所述單克隆抗體在制備急性心肌梗死早期診斷試劑中的應用。

本發(fā)明還提供一種CK-MB蛋白的免疫檢測試劑盒，包括所述的單克隆抗體和辣根過氧化物酶標記的M180抗體。