[發明專利]一種苯并噻唑衍生物及其合成方法和應用

在審

• 申請號: 202010113758.1
• 申請日: 2020-02-24
• 公開（公告）號: CN111205242A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: 黃永飛;陰彩霞;霍方俊
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C07D277/66
• 分類號: C07D277/66;C09K11/06;G01N21/64;A61K49/00
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 張福增

1.一種苯并噻唑衍生物NSSN，其特征在于，結構式為：

2.如權利要求1所述的一種苯并噻唑衍生物NSSN的合成方法，其特征在于，步驟如下：

(1)按摩爾比為1：1-1.3將2-氨基苯硫酚和5-甲基水楊醛在無水二甲基亞砜中混合，攪拌下加入少量的硝酸銀，將混合物在室溫反應2小時后，用二氯甲烷稀釋，鹽水洗滌，合并有機相，減壓除去溶劑，以體積比6:1的石油醚和乙酸乙酯作洗脫劑經硅膠柱色譜分離，純化得淺黃色粉末狀產物，即2-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基苯酚；

(2)按摩爾比為1：2-2.2將2-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基苯酚和六次甲基四胺在三氟乙酸中混合，混合物攪拌回流過夜，然后冷卻至室溫，用氫氧化鉀調節pH直至固體完全沉淀，過濾、洗滌、真空干燥，以體積比5:1的石油醚和乙酸乙酯作洗脫劑經硅膠柱色譜分離，純化得淺黃色粉末狀產物，即為3-(苯并[d]噻唑-2-基)-2-羥基-5-甲基苯甲醛；

(3)按摩爾比為1：2-3將2-甲基苯并噻唑和碘甲烷溶解在無水乙腈中，混合物在氮氣保護下攪拌回流24小時，然后冷卻至室溫，過濾得白色固體即2,3-二甲基苯并噻唑-3-碘化物，未經純化直接進行下一步；

(4)按摩爾比為1：1-1.2將3-(苯并[d]噻唑-2-基)-2-羥基-5-甲基苯甲醛和2,3-二甲基苯并噻唑-3-碘化物在無水乙醇中混合，加入催化量的哌啶，混合物攪拌回流過夜，然后冷卻至室溫，過濾、洗滌、真空干燥即得(E)-2-(3-(苯并[d]噻唑-2-基)-2-羥基-5-甲基苯乙烯基)-3-甲基苯并[d]噻唑-3-碘化物(NSSN)。

3.如權利要求2所述的NSSN的合成方法，其特征在于，所述的步驟(1)中2-氨基苯硫酚和5-甲基水楊醛的摩爾比為1：1。

4.如權利要求2所述的NSSN的合成方法，其特征在于，所述的步驟(2)中2-(苯并[d]噻唑-2-基)-4-甲基苯酚和六次甲基四胺的摩爾比為1：2。

5.如權利要求2所述的NSSN的合成方法，其特征在于，所述的步驟(3)中2-甲基苯并噻唑和碘甲烷的摩爾比為1：2.5。

6.如權利要求2所述的NSSN的合成方法，其特征在于，所述的步驟(4)中3-(苯并[d]噻唑-2-基)-2-羥基-5-甲基苯甲醛和2,3-二甲基苯并噻唑-3-碘化物的摩爾比為1：1。

7.如權利要求1所述的一種苯并噻唑衍生物NSSN在次氯酸檢測中的應用。

8.一種檢測次氯酸的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)、用二甲基亞砜(DMSO)配制2mM NSSN的熒光探針儲備液；

(2)、將2mL的PBS/CH₃CN體積比1:1pH＝7.4的溶液和10μL熒光探針儲備液加到一個熒光比色皿中，在熒光分光光度儀上檢測，隨著次氯酸0-30μM的加入，670nm的熒光強度逐漸減弱，540nm的熒光強度逐漸增強，熒光呈比率型變化；當加入次氯酸30-120μM時，熒光強度由540nm紅移到552nm逐漸增強并趨于穩定，熒光呈“turn-on”型變化；

(3)、以次氯酸濃度為橫坐標，以熒光強度F_670nm/F_540nm為縱坐標繪制圖，得到小濃度次氯酸的工作曲線；線性回歸方程為：y＝-0.103x+2.518，x的單位為10^-6mol/L；以次氯酸濃度為橫坐標，以熒光強度F_552nm為縱坐標繪制圖，得到大濃度次氯酸的工作曲線；線性回歸方程為：y＝29.646x-330.3，x的單位為10^-6mol/L。

9.如權利要求1所述的苯并噻唑衍生物NSSN在制備細胞中次氯酸檢測試劑中的應用。

10.如權利要求1所述的苯并噻唑衍生物NSSN在制備動物皮下次氯酸檢測試劑中的應用。