[發明專利]一種抑制破骨細胞分化的訂書肽及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010113509.2
• 申請日: 2020-02-24
• 公開（公告）號: CN111233977B
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發明（設計）人: 李翔;廖洪利;劉泰容;陳思;叢薇;廖秀飛;胡宏崗;張衛東
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04;C12N5/078;A61K38/10;A61P19/10
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 巫蓓麗

1.一種訂書肽，其特征在于，所述訂書肽選自下列中的一種：

以Ac-GNLIKEAVRRLHSR-NH₂為肽鏈模板，其中7A和11L被S5替換并環合，所述S5為2-amino-2-methylhept-6-enoic acid。

2.權利要求1所述的訂書肽在制備治療骨質疏松癥的藥物中的應用。

3.權利要求1所述的訂書肽在制備抑制破骨細胞分化的試劑中的應用。

4.權利要求1所述的訂書肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)在縮合劑的作用下分別使C端首個氨基酸與固相載體偶聯；

(2)使用脫保護試劑脫去氨基酸上的Fmoc保護基；

(3)在縮合劑作用下連接下一個氨基酸；

(4)重復進行脫保護-耦合操作，依照氨基酸序列合成肽鏈；其中，環合位點以S₅分別替代i和i+4位氨基酸；

(5)最后一個氨基酸脫保護后乙酰化；

(6)在環合劑作用下使i和i+4位S₅氨基酸發生烯烴復分解反應，環合肽鏈；

(7)使用切割試劑將肽鏈從載體上切下，純化后得相應訂書肽。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(7)采用的純化方法為反向高效液相色譜法，條件如下：色譜柱：YMC-Pack ODS-AQ柱；流動相：流動相A為0.1％TFA/水，流動相B為0.1％TFA/乙腈；梯度洗脫程序：25％B洗脫0～5min，25％B～45％B、5～60min；流速為15ml/min，進樣量為5ml，檢測波長214nm。

6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中采用的縮合劑為DIC-Oxyme縮合體系，活化劑為DIC，以NMP為溶劑。

7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述脫保護試劑為Oxyme、哌啶及DMF的混合溶液，比例為71:2:4(m/v/v)。

8.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(5)中，乙酰化試劑為吡啶與醋酸酐的混合液，投料比為1:1(v/v)。

9.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(6)中所述環合劑為GrubbsⅠ試劑的二氯乙烷的溶液，投料比為樹脂載樣量:GrubbsⅠ試劑:二氯乙烷＝0.3:58:6(mmol/mg/ml)。

10.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(7)中，所述切割試劑為TIPS、H₂O和TFA的混合溶液，體積比為2.5:2.5:95，所述切割試劑與直鏈肽的體積質量比為1:10mL/mg。