[發明專利]三層包裹型銅團簇比率熒光探針及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010112251.4
• 申請日: 2020-02-24
• 公開（公告）號: CN111394090A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 杜袁鑫;韓夢;史宏宇
• 申請（專利權）人: 安徽大學
• 主分類號: C09K11/02
• 分類號: C09K11/02;C09K11/58;C09K11/65;G01N21/64
• 代理公司: 合肥中谷知識產權代理事務所(普通合伙) 34146
• 代理人: 洪玲

1.一種三層包裹型銅團簇比率熒光探針，其特征在于，包括內標、二氧化硅和銅納米團簇，所述二氧化硅包裹在內標的外部，銅納米團簇包裹在二氧化硅的外部，形成內標@二氧化硅@銅團簇三層包裹結構的比率熒光探針。

2.根據權利要求1所述的一種三層包裹型銅團簇比率熒光探針，其特征在于，所述銅納米團簇通過靜電吸引策略包裹在二氧化硅的外部。

3.根據權利要求1所述的一種三層包裹型銅團簇比率熒光探針，其特征在于，所述內標為碳點，內部的碳點與外部的銅納米團簇的發光顏色不同，其中內部的碳點對毒品沒有響應，利用外部的銅納米團簇對待檢測毒品的敏感性，實現對毒品的檢測。

4.一種如權利要求1-3任一所述的三層包裹型銅團簇比率熒光探針的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制備內標和銅團簇，并利用與待測毒品特異性結合的抗體對銅團簇進行表面修飾，獲得已修飾抗體的銅團簇；

(2)取正硅酸乙酯，在堿性條件下加入乙醇預水解，加入步驟(1)的內標溶液，制備獲得雙層包裹結構的內標@二氧化硅；

(3)將內標@二氧化硅與已修飾抗體的銅團簇混合，制備三層包裹結構的內標@二氧化硅@銅團簇，獲得所述比率熒光探針。

5.根據權利要求4所述的一種三層包裹型銅團簇比率熒光探針的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中：

內標為發藍色熒光的碳點，制備方法包括：將L-脯氨酸加入超純水中，于聚四氟乙烯不銹鋼高壓釜中，在180℃下反應；反應結束后自然冷卻至室溫，0.45μM微孔濾膜過濾去除大顆粒和沉淀；再用5000Da的透析袋透析，得內標；

銅團簇為發射橙色熒光的銅納米團簇，制備方法包括：將銅鹽和含有羧基官能團的表面配體在超純水中混合，用堿性物質調節pH至3-5，獲得混合液，向混合液中加入不良溶劑，然后離心，得到沉淀進行真空干燥，得銅團簇；

利用與待測毒品特異性結合的抗體對銅團簇進行表面修飾，獲得已修飾抗體的銅團簇的方法包括：將1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺鈉鹽的水溶液混合，加入與待測毒品特異性結合的單克隆抗體，攪拌混勻，獲得備用抗體溶液；將銅團簇分散在水中，獲得銅團簇分散液；將備用抗體溶液與銅團簇分散液混合，在37℃下孵化，完成銅團簇表面抗體修飾。

6.根據權利要求4所述的一種三層包裹型銅團簇比率熒光探針的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中，將內標@二氧化硅與已修飾抗體的銅團簇混合，同時在反應體系中加入陽離子聚合物電解質，通過靜電吸引策略將銅團簇與二氧化硅連接在一起。

7.根據權利要求6所述的一種三層包裹型銅團簇比率熒光探針的制備方法，其特征在于，所述陽離子聚合物電解質選自聚二烯丙基二甲基氯化銨，聚乙烯亞胺鹽酸鹽、聚乙烯吡啶、聚乙烯胺中的一種或多種混合物。

8.一種如權利要求1-3任一所述的三層包裹型銅團簇比率熒光探針在檢測毒品中的應用。