[發明專利]一種人源化皮膚型紅斑狼瘡小鼠模型的構建方法和應用

有效

• 申請號: 202010110769.4
• 申請日: 2020-02-24
• 公開（公告）號: CN111149767B
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發明（設計）人: 陸前進;吳海競;李倩文;周素清;趙明
• 申請（專利權）人: 中南大學湘雅二醫院
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所(普通合伙) 43114
• 代理人: 袁靖

1.一種人源化皮膚型紅斑狼瘡小鼠模型的構建方法，其特征在于，將疾病活躍期系統性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞皮下注射裸鼠，聯合UVB照射處理；皮下注射的細胞個數至少1×10 ⁷ 個；

采用每日總輻照劑量為200-500mJ/cm ² 高劑量UVB照射至造模小鼠出現持續性瘢痕樣；之后采用每日總輻照劑量為80-120mJ/cm ² 低劑量UVB照射維持皮損，直至建模完成；

疾病活躍期系統性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞注射前先用高劑量UVB照射2-4天，然后將疾病活躍期系統性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞注射到裸鼠皮下部位，此后繼續用此輻照劑量連續照射1周-3周；然后將低劑量UVB繼續連續照射1-3周，停止UVB輻照。

2.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，

采用每日總輻照劑量為250-350mJ/cm ² 高劑量UVB照射至造模小鼠出現持續性瘢痕樣；之后采用每日總輻照劑量為100mJ/cm ² 低劑量UVB照射維持皮損，直至建模完成；

疾病活躍期系統性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞注射前先用高劑量UVB照射3天，然后將疾病活躍期系統性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞注射到裸鼠皮下部位，此后繼續用此輻照劑量連續照射1周-3周；然后將低劑量UVB繼續連續照射1-3周，停止UVB輻照。

3.根據權利要求2所述的構建方法，其特征在于，

采用每日總輻照劑量為300mJ/cm ² 高劑量UVB照射至造模小鼠出現持續性瘢痕樣；之后采用每日總輻照劑量為100mJ/cm ² 低劑量UVB照射維持皮損，直至建模完成。

4.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述的皮下注射部位為背部。

5.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，小鼠在行疾病活躍期系統性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞皮下注射之前，按照每日10×100uW/cm ² 強度UVB照射300s，連續UVB照射3天后，將剛分離的1×10 ⁷ 細胞數的疾病活躍期系統性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞注射到裸鼠背部皮下部位；此后繼續予小鼠每日相同強度和時間紫外輻照處理，直至造模裸鼠存在持續性瘢痕樣紅斑，然后每日予以10×100uW/cm ² 強度UVB照射100s照射連續1-3周，以維持皮損形態，即建立穩定的模型。

6.權利要求1-5任一項所述的方法構建的所述的人源化皮膚型紅斑狼瘡小鼠模型在探討CLE疾病進展的發生機制以及靶向狼瘡皮損的藥物研發中的應用。

7.疾病活躍期系統性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞和紫外線在制備構建權利要求1-5任一項所述的方法構建的人源化皮膚型紅斑狼瘡小鼠模型中的應用。