[發明專利]一種生化反應試管及其使用方法和基因擴增試劑盒

有效

• 申請號: 202010110246.X
• 申請日: 2020-02-23
• 公開（公告）號: CN111218392B
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 許向華;何小明;周中人;張磊
• 申請（專利權）人: 上?？祆`生物科技有限公司;上?？祆`生物工程有限公司
• 主分類號: C12M1/24
• 分類號: C12M1/24;C12M1/38;C12M1/34;C12M1/02;C12Q1/686
• 代理公司: 上海領譽知識產權代理有限公司 31383
• 代理人: 車超平

本發明公開了一種生化反應試管及其使用方法和基因擴增試劑盒，生化反應試管包括管部和蓋部，所述管部包括：管體，所述管體包括有第一腔室和第二腔室，所述第二腔室的底部與所述第一腔室的底部具有一定距離；限位單元，所述限位單元設置于所述管體的外側；其中，當所述蓋部封閉所述管部時，所述第一腔室的頂部與所述第二腔室的頂部連通。其優點在于，通過設置第一腔室和第二腔室來放置不同的反應組分及溶液，而且第一腔室和第二腔室的高低位置不同；在實際使用時，僅第一腔室和第二腔室中的一個被獨立加熱完成生化反應另一個不被加熱；將試管垂直翻轉180°并進行振蕩操作時，第一腔室和第二腔室內的溶液混合并進行進一步反應，以消除有害結果。

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，尤其涉及一種生化反應試管及其使用方法和基因擴增試劑盒。

背景技術

在常規的小型生化反應中，一般是單個的試管內設置一個腔體并放置一種溶液，當需要多個溶液參與反應時，將不同試管的溶液吸取后加入其它反應試管。當存在一些特殊原因如試劑污染時，可在試管內設置一個擋板將試管分隔為兩部分，分別將A/B兩個溶液放置在同一個試管的不同腔體內，在不開蓋的情況下將A/B溶液進行混合反應，避免了試劑外泄污染。

核酸擴增如PCR反應的最大特點是具有較大的擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，當實驗室樣本和擴增目標經常出現大量相同的情況時，核酸氣溶膠污染在實驗區域內不斷累積，污染風險不斷增加，假陽性的發生頻率也會越來越高。PCR技術的高擴增效率產生的核酸氣溶膠污染，會導致檢測結果的假陽性。假陽性意味著實驗不可信，并且直接造成實驗室經濟損失。更嚴重的是，如果形成氣溶膠污染，則可引起整個PCR實驗室的污染，甚至要關閉實驗室。

PCR擴增產物污染是最主要最常見的污染。極微量的PCR產物污染就可造成假陽性。最可能造成PCR產物污染的形式是氣溶膠污染。氣溶膠是懸浮于氣體介質中粒徑一般為0.001μm～1000μm的固體、液體微小粒子形成的膠溶狀態散體系。核酸氣溶膠即DNA/RNA氣溶膠，是分散并懸浮在氣體介質中的核酸聚合物，廣泛存在于實驗室桌面、儀器、耗材以及空氣中，據計算一個氣溶膠顆?？珊?8000拷貝。核酸氣溶膠與PCR過程相伴相生，操作時空氣與液體面摩擦，離心機離心，劇烈地搖動反應管，反應管開蓋，吸樣時及移液器的反復吸樣，污染物的外泄等途徑，都會產生核酸氣溶膠。

除了PCR擴增方法外，目前核酸恒溫擴增方法也逐步進入實驗室。目前主要包括以下幾種：環介導恒溫擴增(loop－mediated isothermal amplification，LAMP)、切口酶核酸恒溫擴增(nicking enzyme mediated amplification，NEMA)、鏈替代擴增(stranddisplacement amplification，SDA)、滾環擴增(rolling circle amplification，RCA)、依賴解旋酶的恒溫基因擴增(helicase－dependent isothermal DNA amplification，HAD)、轉錄依賴的擴增系統(transcription－based amplification system，TAS)、依賴核酸序列的擴增(NASBA)又稱自主序列復制系統(self－sustained sequence replication，3SR)、QB復制酶擴增(Q－beta replicase－amplified assay)等。恒溫擴增擺脫了熱循環的限制，使其應用范圍大大增加，而且目前應用的恒溫擴增方法都有較高的敏感性和特異性，在核酸檢測中應用范圍非常廣。但敏感性高會帶來擴增物污染和假陽性的問題，從而導致反應結果判讀不準確。