[發(fā)明專利]基于雙鏈DNA肽連接酶的JAK2基因特定突變檢測(cè)試劑盒及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010109696.7
• 申請(qǐng)日: 2020-02-22
• 公開（公告）號(hào): CN111004841B
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃志玲;黃種山;其他發(fā)明人請(qǐng)求不公開姓名
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黃志清
• 主分類號(hào): C12Q1/6858
• 分類號(hào): C12Q1/6858
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突變的檢測(cè)試劑盒，其特征在于試劑盒包括：（1）dDPlaseII連接酶，dDPlaseII連接酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，對(duì)應(yīng)的基因編碼序列如SEQ ID NO：2所示；（2）dDPlaseII連接酶緩沖液，pH為7.8，由450mM Tris-Hcl、100mM Mg²⁺、80mM NaCl、20mM ATP和8mM Triton X-100組成，每1μl反應(yīng)體系中添加0.1μl的連接酶緩沖液；（3）RNase H酶及其配套的緩沖液，采用美國(guó)Thermo Fisher公司產(chǎn)品；（4）磁載多肽Ps，即包被多肽Ps的鏈霉親和素磁珠，其中多肽Ps的氨基酸序列為N’-EAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGMANCEHL-C’，其N端氨基酸E已經(jīng)經(jīng)過(guò)生物素修飾；（5）RNA引物Pr，其序列為5’-AUUUACAUUAUUGUUCCAGCAUU-3’；（6）DNA引物Pn，其序列為5’-CATTGACTGGAGGAAATTGAG-3’；（7）DNA片段Pd，其序列為5’-AATGCTGGAACAATAATGTAAAT-3’；和（8）DNA引物Pm，其序列為5’-CTGGATCATATAGATCTGTAAAG-3’；所述JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突變是以NCBI登錄號(hào)為NG_009904.1的JAK2野生型基因作為參考序列的。