[發明專利]一種檢測魯西黑頭羊體重性狀的DNA檢測方法及其應用

有效

• 申請號: 202010108076.1
• 申請日: 2020-02-21
• 公開（公告）號: CN111154894B
• 公開（公告）日: 2022-02-25
• 發明（設計）人: 宋恩亮;雒云云;姜富貴;藍賢勇;成海建;毛翠;張果平;魏晨
• 申請（專利權）人: 山東省農業科學院畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 濟南誠智商標專利事務所有限公司 37105
• 代理人: 房一粟

1.一種檢測魯西黑頭羊體重性狀的DNA檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

以待測魯西黑頭羊全基因組DNA為模板，以引物對P1為擴增引物，利用PCR擴增包含綿羊HIAT1基因5’UTR區插入/缺失多態性位點的片段，對PCR擴增產物進行電泳，根據電泳結果進行判斷，只有148bp帶紋的為插入/插入基因型，即II基因型；只有139bp帶紋的為缺失/缺失基因型，即DD基因型；兩者都有的為插入/缺失基因型，即ID基因型；DD基因型的個體的魯西黑頭羊的體重性狀優于其他基因型個體；

所述插入/缺失多態性位點選自綿羊HIAT1基因NC_040252.1:g.76575229_76575230位9-bp插入/缺失多態性位點，其中9-bp插入/缺失的序列如SEQ.ID.NO3所示；

所述引物對P1包括上游引物和下游引物，所述上游引物的序列如SEQ.ID.NO1所示，所述下游引物序列如SEQ.ID.NO2所示。

2.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述PCR擴增的反應體系如下所述：

PCR體系為13μL，包括2×Taq PCR SuperMix 6.5 μL；上游引物0.25 μL；下游引物0.25μL；基因組DNA 0.5 μL；去離子水5.5 μL。

3.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述PCR擴增的PCR程序如下所示：

95 ℃預變性5 min；94 ℃變性30 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸10 s，12個循環，每循環后退火溫度減1 ℃；50 ℃退火30 s，72 ℃延伸10 s，34個循環；72 ℃延伸10 min。

4.如權利要求1-3任一項所述的檢測魯西黑頭羊體重性狀的DNA檢測方法在魯西黑頭羊分子標記輔助選擇育種中的應用。