[發(fā)明專利]一種雜交鵝掌楸LhAP2L基因及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010106603.5
• 申請日: 2020-02-20
• 公開（公告）號: CN111118033B
• 公開（公告）日: 2020-12-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳金慧;王鵬凱;李美平;施季森;魏繼福;周艷威;陸葉;成鐵龍
• 申請（專利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/82;A01H5/02;A01H6/82
• 代理公司: 南京申云知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

本發(fā)明公開了一種雜交鵝掌楸LhAP2L基因及其應(yīng)用，屬于植物分子生物學和基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過克隆獲得雜交鵝掌楸LhAP2L基因，觀察轉(zhuǎn)LhAP2L基因煙草的表型發(fā)現(xiàn)：LhAP2L基因的表達使花瓣數(shù)目增多，花柱頭分裂數(shù)由2變3；花器官變異后所結(jié)果實比野生型體積小，數(shù)量少，并出現(xiàn)干癟；測得30株轉(zhuǎn)基因陽性植株株高平均值為127.1cm，而野生型平均株高為118.2cm。觀察轉(zhuǎn)LhAP2L基因擬南芥，發(fā)現(xiàn)花器官的花萼和雌蕊相比野生型增大。因此本申請?zhí)峁┑碾s交鵝掌楸LhAP2L基因具有促進營養(yǎng)生長，抑制生殖生長及改變花器官發(fā)育形態(tài)的作用，可用于花卉培育和促進植物營養(yǎng)生長抑制生殖生長的應(yīng)用中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物分子生物學和基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種雜交鵝掌楸LhAP2L(APETALA2-like)基因及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

AP2是擬南芥一系列調(diào)節(jié)花發(fā)育的重要基因之一，該基因不含有MADS盒結(jié)構(gòu)，具獨特的結(jié)構(gòu)特征。Jofuku等首先分離到擬南芥的AP2基因，并且首次鑒定出擬南芥中AP2基因的AP2/EREBP結(jié)構(gòu)域，含有2段特別保守的氨基酸序列，分別為YRG和RAYD元件。AP2所編碼的AP2/EREBP轉(zhuǎn)錄因子的主要特征是都至少含有一個由60到70個左右的氨基酸殘基組成的高度保守的DNA結(jié)合區(qū)，稱作AP2結(jié)合域。在擬南芥中，AP2/ERF家族，包括AP2(含有2個AP2域)、RAV(Related-to-ABI3/VP1)、DREB(dehydration responsive element bindingprotein)、ERF(ethylene responsivefactor)和其他亞家族(含有單個AP2域)。

含有AP2/EREBP結(jié)合域的轉(zhuǎn)錄因子在植物中廣泛存在，在植物生命周期中發(fā)揮多種作用，如參與植物的生長、發(fā)育，調(diào)控花器官特性的特化，控制葉片表皮細胞的身份，參與多種生理生化反應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導，響應(yīng)多種生物脅迫和環(huán)境脅迫等。AP2/ERF類轉(zhuǎn)錄因子參與水楊酸、脫落酸、乙烯、茉莉酸等多種信號轉(zhuǎn)導途徑，而且是逆境信號交叉途徑中的連接因子。

在木本植物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一些AP2同源基因，且不同植物中的AP2同源基因與擬南芥中的AP2基因功能不盡相同，說明不同植物間AP2同源基因在功能上存在著一定的差異。在不同植物上開展AP2同源基因功能的分析對于認識基因的功能特點及進一步利用具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問題，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種雜交鵝掌楸LhAP2L基因，該基因有促進營養(yǎng)生長，抑制生殖生長及改變花器官發(fā)育形態(tài)的作用。本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供所述雜交鵝掌楸LhAP2L基因的應(yīng)用。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

一種雜交鵝掌楸LhAP2L基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述的雜交鵝掌楸LhAP2L基因的表達蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

含有雜交鵝掌楸LhAP2L基因的載體、重組菌或宿主細胞。

所述的含有雜交鵝掌楸LhAP2L基因的載體為植物重組表達載體。

所述的含有雜交鵝掌楸LhAP2L基因的宿主細胞為農(nóng)桿菌EHA105。

所述的雜交鵝掌楸LhAP2L基因在改變花器官發(fā)育形態(tài)、促進植物營養(yǎng)生長或抑制生殖生長中的應(yīng)用。

所述的應(yīng)用包括以下步驟：

1)構(gòu)建雜交鵝掌楸LhAP2L基因的載體；

2)將所構(gòu)建的雜交鵝掌楸LhAP2L基因的載體轉(zhuǎn)化到植物或植物細胞中；

3)培育篩選得到花器官發(fā)育形態(tài)改變、營養(yǎng)生長增強或生殖生長被抑制的植株。