[發明專利]一種從痰液中檢測結核分枝桿菌的方法有效
| 申請號: | 202010103989.4 | 申請日: | 2020-02-20 |
| 公開(公告)號: | CN111197098B | 公開(公告)日: | 2023-08-22 |
| 發明(設計)人: | 李傳友;劉毅;張旭霞;于佳佳 | 申請(專利權)人: | 首都醫科大學附屬北京胸科醫院;北京市結核病胸部腫瘤研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/689 | 分類號: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12R1/32 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 白艷 |
| 地址: | 101149 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 痰液中 檢測 結核 分枝桿菌 方法 | ||
1.一種試劑盒,其包括如下1)-8)所示的物質:
1)擴增含有6110-crRNA靶序列的引物對;
2)6110-crRNA,其靶序列為序列3;所述6110-crRNA的核苷酸序列為序列4;
3)LwCas13a蛋白,其氨基酸序列由序列表中序列2所示的氨基酸殘基組成;
4)NTP?Mix;
5)T7?RNA?Polymerase
6)10×Nuclease?assay?buffer
7)Background?RNA;
8)MgCl2;
所述擴增含有6110-crRNA靶序列的引物對由引物1和引物2組成:
所述引物1為序列5所示的單鏈DNA分子;
所述引物2為序列6所示的單鏈DNA分子。
2.一種試劑盒,包括如下A和B所示的物質:
A)擴增含有6110-crRNA靶序列的引物對;
B)含有6110-crRNA和LwCas13a蛋白的擴增體系;
所述擴增體系還包括:NTP?Mix、T7?RNA?Polymerase、10×Nuclease?assay?buffer、Background?RNA、MgCl2;
所述6110-crRNA的靶序列為序列3;所述6110-crRNA的核苷酸序列為序列4;
所述LwCas13a蛋白,其氨基酸序列由序列表中序列2所示的氨基酸殘基組成;所述擴增含有6110-crRNA靶序列的引物對由引物1和引物2組成:
所述引物1為序列5所示的單鏈DNA分子;
所述引物2為序列6所示的單鏈DNA分子。
3.根據權利要求1-2中任一所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒中1)-3)所述的物質均單獨包裝;
或所述試劑盒中A和B所述的物質均單獨包裝。
4.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于:
所述試劑盒為具有如下1)和/或2)功能的試劑盒;
1)檢測待測菌是否為結核分枝桿菌;
2)檢測待測樣本是否含有或感染結核分枝桿菌。
5.權利要求1-4中任一所述的試劑盒在制備檢測待測樣本是否感染或候選感染或含有或候選含有結核分枝桿菌產品中的應用;
或,權利要求1-4中任一所述的試劑盒在制備檢測待測菌是否為或候選為結核分枝桿菌產品中的應用。
6.權利要求1-4任一中1)-8)所示的物質或A和B所示的物質在制備檢測待測樣本是否感染或候選感染或含有或候選含有結核分枝桿菌產品中的應用;
或,權利要求1-4任一中1)-8)所示的物質或A和B所示的物質在制備檢測待測菌是否為或候選為結核分枝桿菌產品的應用。
7.根據權利要求5或6所述的應用,其特征在于:所述待測樣本為痰液。
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