[發(fā)明專利]一種泊洛沙姆和/或泊洛沙胺與脂質組合的復合物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010103244.8
• 申請日: 2020-02-19
• 公開（公告）號: CN111281982A
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發(fā)明（設計）人: 張龍貴;劉晨
• 申請（專利權）人: 深圳厚存納米藥業(yè)有限公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K9/51;A61K47/18;A61K47/10;A61K39/00;A61P31/16;A61P35/00;B82Y5/00;B82Y30/00;C12N15/87
• 代理公司: 廣東品安律師事務所 44420
• 代理人: 劉井

一種泊洛沙姆和/或泊洛沙胺與脂質組合的復合物，涉及基因治療領域，其包括泊洛沙姆和/或泊洛沙胺與脂質。所述復合物由中的任意一種與DOTAP和DOPE組成；所述復合物作為核酸載體比病毒載體成本低，便于質量控制，比一般納米載體轉染效率高，毒性小，生物相容性好，在體外實驗中給藥后無需換液，特別適合離體細胞的轉染，體內體外轉染均有較高表達，且制備簡單，創(chuàng)造性地解決了核酸尤其是mRNA安全高效地在體內外遞送的難題。

技術領域

本發(fā)明涉及基因治療領域，具體涉及一種用于核酸遞送的泊洛沙姆和/或泊洛沙胺與脂質組合的復合物納米粒，以及制備這種復合物納米粒的方法，及其用于體內外細胞基因轉染的用途，及其在疫苗新藥領域的應用。

背景技術

基因治療是指將外源治療性基因導入靶細胞，以糾正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達到治療目的。基因遞送是通過遞送技術將有生物活性的外源治療性基因遞送至病人的受體細胞中，并使外源治療性基因翻譯產生蛋白多肽從而治療某種疾病。基因轉染是一種將具生物功能的核酸轉移或運送到細胞內并使核酸在細胞內維持其生物功能的技術。疫苗一般分為兩類：預防性疫苗和治療性疫苗。預防性疫苗主要用于疾病的預防，接受者為健康個體或新生兒；治療性疫苗主要用于患病的個體，接受者為患者，如腫瘤患者。預防性疫苗是將病原微生物(如細菌、立克次氏體、病毒等)及其代謝產物，經(jīng)過人工減毒、滅活或利用轉基因等方法制成的用于預防傳染病的自動免疫制劑。疫苗保留了病原菌刺激動物體免疫系統(tǒng)的特性。當動物體接觸到這種不具傷害力的病原菌后，免疫系統(tǒng)便會產生一定的保護物質，如免疫激素、活性生理物質、特殊抗體等；當動物再次接觸到這種病原菌時，動物體的免疫系統(tǒng)便會依循其原有的記憶，制造更多的保護物質來阻止病原菌的傷害。腫瘤疫苗屬于治療性疫苗，其工作原理是將腫瘤細胞、腫瘤相關蛋白或多肽、表達腫瘤抗原的基因等，導入患者體內，克服腫瘤引起的免疫抑制狀態(tài)，增強免疫原性，激活患者自身的免疫系統(tǒng)，誘導機體細胞免疫和體液免疫應答，從而達到控制或清除腫瘤的目的。

mRNA疫苗是近幾年發(fā)展起來的新型疫苗，是繼減毒疫苗、基因工程疫苗、DNA 疫苗之后的第5代新型疫苗，安全性比DNA疫苗更具優(yōu)勢。mRNA疫苗作為一種新的應對方案，是將編碼抗原蛋白的mRNA直接導入細胞，通過細胞的表達系統(tǒng)合成蛋白,從而誘導特異免疫應答，與傳統(tǒng)的減毒活疫苗、滅活疫苗、亞單位疫苗(含多肽疫苗)、載體疫苗、DNA疫苗相比有明顯的優(yōu)勢。

首先，mRNA可被正常的細胞過程降解，降低代謝毒性的風險，體內半衰期可以通過某些修飾和遞送方式進行調節(jié)，因此mRNA在體內會經(jīng)歷一個自然的降解過程；其次， mRNA易于合成，可編碼任何新抗原，mRNA疫苗可以快速制備；另外，mRNA水溶性較好，更易成藥，通過搭載各種修飾和遞送方式，可有效提高mRNA疫苗穩(wěn)定性，避免其在進入細胞前被體內RNA酶所降解；mRNA進入胞內后通過蛋白質翻譯由機體自體產生足夠的新抗原以快速啟動局部T細胞，mRNA疫苗能夠有效誘導B細胞和T細胞免疫應答，能引起免疫記憶效果，可以傳遞更多有效抗原。免疫原性方面，mRNA疫苗可以被專門設計為編碼多種肽和蛋白質結構，從而表達整個抗原，還可以設計成一次表達多個抗原或在同一個納米制劑中包含幾個甚至幾十段IVTmRNA序列用于制備多價 mRNA疫苗。此外mRNA疫苗是非感染性的，屬于非集成平臺，避免了感染和插入突變的風險，還有成本低，便于保存和運輸?shù)膬?yōu)點。