[發(fā)明專利]一種溶藻菌、篩選方法及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010101591.7
• 申請日: 2020-02-19
• 公開（公告）號: CN111269855A
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王美娟;張文藝;張小梅;薛靜靜;許明宸
• 申請（專利權(quán)）人: 常州大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12Q1/04;C02F3/34;C12R1/01
• 代理公司: 南京縱橫知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32224
• 代理人: 董建林

本發(fā)明公開了一種溶藻菌、篩選方法及應(yīng)用，其溶藻菌類芽孢桿菌（Paenibacillus sp.）XXG的菌株現(xiàn)保藏于中國科學(xué)院微生物研究所的中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心(CGMCC)，保藏時間為：2019年4月1日，保藏編號：CGMCC No.17503。是從土壤中篩選出來的，并給出了將所述的溶藻菌在去除水系中銅綠微囊藻的應(yīng)用。本發(fā)明所篩選的溶藻菌XXG具有生態(tài)適應(yīng)性好，安全性高，提取成本較低，方法簡單可行等優(yōu)點。且適用于自然水系的條件，能有效地控制藍(lán)藻的爆發(fā)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于控藻的微生物學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種溶藻菌、篩選方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

每年夏秋季節(jié)太湖、巢湖、滇池等我國一些重要流域水華頻發(fā)，有害水藻水華(HAB)嚴(yán)重影響漁業(yè)生產(chǎn)、居民用水安全以及區(qū)域生態(tài)安全。銅綠微囊藻是太湖流域HAB的優(yōu)勢藻種之一，因其產(chǎn)生的藻毒素毒性大、難降解、可被生物富集，已成為水環(huán)境中的公害。后來在實踐中發(fā)現(xiàn)太湖水系HAB爆發(fā)期間，當(dāng)?shù)剞r(nóng)民用含HAB的藻水灌溉水稻田，而水稻田水中并未出現(xiàn)藍(lán)藻，猜測稻田中的植物根部或微生物具有溶藻作用。因此，考慮到從自然稻田土壤中篩選一株生態(tài)適應(yīng)性好的溶藻菌具有可行性。

然而，溶藻菌控藻研究首先就是要從土壤中分離出高效溶藻菌。現(xiàn)階段分離篩選溶藻菌的方法，主要是利用細(xì)菌培養(yǎng)液感染藻細(xì)胞，通過測定葉綠素a(Chl-a)濃度考察溶藻率，但該方法篩選出的溶藻菌生態(tài)適應(yīng)性及應(yīng)用價值有待考慮，且未能排除培養(yǎng)基對藻細(xì)胞生長產(chǎn)生的影響。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述問題，本發(fā)明的目的在于從土壤中、尤其是水稻根系土壤中篩選出一株具有良好溶藻性能的菌株，并將該菌株應(yīng)用于控制藍(lán)藻中的優(yōu)勢藻類銅綠微囊藻，以降低藍(lán)藻爆發(fā)的幾率。

實現(xiàn)上述技術(shù)目的，達(dá)到上述技術(shù)效果，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：

本發(fā)明提供一種溶藻菌XXG，經(jīng)鑒定為其為類芽孢桿菌Paenibacillus sp.，現(xiàn)保藏于中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所的中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心(CGMCC)，保藏時間為：2019年4月1日，保藏編號：CGMCCNo.17503。

本發(fā)明還提供了一種篩選該溶藻菌的方法，包括如下步驟：

1)將土壤和藻類細(xì)胞液混合培養(yǎng)，在溫度28℃～30℃條件下振蕩混合5-10d，直至培養(yǎng)液顏色發(fā)生變化；

2)取一定量經(jīng)步驟1)后的培養(yǎng)液用新鮮的藻類細(xì)胞液按比例定容，采用與步驟1)相同的培養(yǎng)條件重復(fù)操作至少3次，獲得富集菌液；

3)將富集菌液稀釋，將稀釋菌液進(jìn)行平板涂布，進(jìn)一步培養(yǎng)2-3d，挑取不同單菌落并多次平板劃線培養(yǎng)得到純化菌株；

4)用藻類細(xì)胞液對純化分離的各個單菌落檢測其溶菌效果，篩選出溶藻菌。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述的土壤選自水稻根系土壤。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述的藻類選自藍(lán)藻水華藻種，主要采用的是銅綠微囊藻。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述的步驟1)和步驟2)觀察培養(yǎng)液是否發(fā)生黃化；所述步驟4)中比較不同菌種所對應(yīng)的檢測液的黃化程度。

本發(fā)明還提供了將所述的溶藻菌在去除水系中銅綠微囊藻的應(yīng)用。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，選取對數(shù)生長期的溶藻菌去除水系中銅綠微囊藻。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所投入的溶藻菌與銅綠微囊藻的體積比為5.0％-6.0％，投入的時間間隔為5-8d。