[發明專利]一種西番蓮新品種的培育方法

有效

• 申請號: 202010100975.7
• 申請日: 2020-02-19
• 公開（公告）號: CN111357647B
• 公開（公告）日: 2022-03-11
• 發明（設計）人: 蔡年輝;唐軍榮;許玉蘭;孫琪;趙李姍;王亞楠;張煥;朱雅靜
• 申請（專利權）人: 西南林業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01H1/08
• 代理公司: 北京挺立專利事務所(普通合伙) 11265
• 代理人: 劉陽

本發明提供一種西番蓮新品種的培育方法，采用西番蓮的滿天星品種進行胚乳培養最終獲得三倍體植株。本發明通過對西番蓮的滿天星品種進行胚乳培養成功的獲得了一批三倍體植株，利用這種育種方法培育適用于加工和食用的無籽或少籽的優良的西番蓮新品種。

技術領域

本發明涉及多倍體育種技術領域，尤其涉及一種西番蓮新品種的培育方法。

背景技術

性育種已成為目前育種學家應用最廣泛的方法之一，它可以作為遺傳物質傳遞的載體，并能達到無核或少核及克服自交不親和性等目的，培育適用于加工和食用的無籽或少籽的優良的西番蓮新品種，對西番蓮的發展具有重要的作用。但目前西番蓮多倍體的研究不能滿足生產發展的需要。傳統的多倍體育種主要依靠秋水仙素，但秋水仙素誘導多倍體所獲得的純合四倍體少，嵌合體多，而通過不斷的純化等方式又需要的時間較長。

發明內容

本發明的目的在于解決上述現有技術存在的缺陷，提供一種通過胚乳誘導、分化、直接形成三倍體再生植株的方法，不用純化，解決了現有技術中存在西番蓮多倍體誘導進展較慢的問題。

一種西番蓮新品種的培育方法，采用西番蓮的滿天星品種的胚乳進行培養獲得三倍體植株。

進一步地，如上所述的西番蓮新品種的培育方法，采用西番蓮的滿天星品種的胚乳進行培養包括以下步驟：

步驟一：胚乳的獲取；

步驟二：胚乳愈傷組織的誘導；

步驟三：愈傷組織的增殖分化；

步驟四：再生三倍體植株；

步驟五：植株生根培養；

其中，所述步驟一包括以下步驟：

步驟1：把飽滿的滿天星種子粒放到80％濃度的濃硫酸里浸泡3.5h，然后清洗被濃硫酸浸泡過的滿天星種子；

步驟2：用小刀刮去濃硫酸浸泡軟化的外種皮；

步驟3：把種子放用75％酒精消毒20S,再用0.1％的升汞消毒8min；

步驟4：把種子放到無菌操作臺上，在此過程中要不斷搖晃，使種子能夠充分消毒，減少種子受污染程度；

步驟5：消毒完種子之后用事先準備好的無菌蒸餾水對其進行沖洗，再進行種子剝殼及胚乳的切取。

進一步地，如上所述的西番蓮新品種的培育方法，所述步驟二包括：

步驟1：將培養基放入121℃的高溫滅菌箱里滅菌30min；所述培養基為：MS+30g/L蔗糖+3.7g/L瓊脂+0.5mg/l TDZ，PH＝5.8；

步驟2：放置1d后把培養基用75％的酒精消毒后，放入無菌操作臺上用紫外燈照射30min；

步驟3：然后剝掉經處理過的種子外殼，去掉子葉后把胚乳分成2部分接入培養基中暗培養15d；

步驟4：暗培養后再自然光繼續培養15d，得到愈傷組織。

進一步地，如上所述的西番蓮新品種的培育方法，所述步驟三包括：

把愈傷組織接入1/2MS+2mg/l 6-BA+0.4mg/l IBA的培養基中培養30d。

進一步地，如上所述的西番蓮新品種的培育方法，所述步驟四包括：把愈傷組織分化出的芽接入MS+1mg/l 6-BA+0.2mg/l IAA培養基中培養，得到三倍體植株。

進一步地，如上所述的西番蓮新品種的培育方法，所述步驟五包括：

把健壯的植株接入1/2MS+2mg/l 6-BA+0.4mg/l IBA+0.1g/l碳粉培養基中進行生根培養。