[發明專利]綿羊GHR基因插入/缺失多態性的檢測引物對、試劑盒、方法和應用

在審

• 申請號: 202010098387.4
• 申請日: 2020-02-18
• 公開（公告）號: CN111118178A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 張清峰;藍康澍;曹如;潘傳英;林春建;尹靜;李飛;趙軍軍;趙京峰;藍賢勇
• 申請（專利權）人: 天津奧群牧業有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司 12209
• 代理人: 李晶

1.一種綿羊GHR基因插入/缺失多態性檢測用引物對，其特征在于：所述引物對能夠用于PCR擴增包含綿羊GHR基因內含子區插入/缺失多態性位點的片段。

2.根據權利要求1所述的綿羊GHR基因插入/缺失多態性檢測用引物對，其特征在于：所述插入/缺失多態性位點為綿羊GHR基因NC_040267.1:g.32005124_32005146位23-bp插入/缺失多態性位點。

3.根據權利要求1或2所述的綿羊GHR基因插入/缺失多態性檢測用引物對，其特征在于：所述引物對為：

上游引物：SEQ NO.1；

下游引物：SEQ NO.2。

4.如權利要求1至3任一項所述的綿羊GHR基因插入/缺失多態性檢測用引物對在綿羊產羔數分子標記輔助選擇育種方面中的應用。

5.一種包含如權利要求1至3任一項所述的引物對的綿羊GHR基因插入/缺失多態性的檢測試劑盒。

6.一種利用如權利要求1至3任一項所述的引物對的綿羊GHR基因插入/缺失多態性的檢測方法，其特征在于：步驟如下：

以待測綿羊基因組DNA為模板，以引物對為擴增引物，利用PCR擴增包含綿羊GHR基因內含子區插入/缺失多態性位點的片段，對擴增產物進行電泳，根據電泳結果鑒定所述插入/缺失多態性位點的基因型。

7.根據權利要求6所述的綿羊GHR基因插入/缺失多態性的檢測方法，其特征在于：所述PCR擴增采用的反應程序為：95℃預變性5min；94℃變性30s，68℃退火30s，72℃延伸12～24s，18個循環，每循環后退火溫度減1℃；50℃退火30s，72℃延伸12～24s，25～30個循環；72℃延伸10min；

或者，所述電泳時采用質量濃度為3.0～3.5％的瓊脂糖凝膠。

8.根據權利要求6或7所述的綿羊GHR基因插入/缺失多態性的檢測方法，其特征在于：根據電泳結果，所述插入/缺失多態性位點的插入/插入基因型II表現為237bp一條帶紋，插入/缺失基因型ID表現為237bp和260bp兩條帶紋，缺失/缺失基因型DD表現為260bp一條帶紋。

9.一種如權利要求6至8任一項所述的綿羊GHR基因插入/缺失多態性的檢測方法在綿羊產羔數分子標記輔助選擇育種方面中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于：所述應用為：所述檢測方法得到的插入/缺失多態性位點的基因型作為提高綿羊第3胎產羔數的DNA標記方面中的應用。