[發明專利]一種利用RRAD遺傳標記檢測牛胴體和肉質性狀的方法

有效

• 申請號: 202010097319.6
• 申請日: 2020-02-18
• 公開（公告）號: CN110982912B
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發明（設計）人: 房希碧;李曉慧;趙志輝;楊潤軍;于海濱;姜平;夏立新;張修齊;何維;張福成
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6869
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 陳宏偉

1.RRAD基因的單核苷酸多態性作為牛肉質和胴體性狀分子標記中的用途，其特征在于：上述基因的單核苷酸多態性位點SNP1為牛RRAD基因的3’UTR的198bp處，單核苷酸多態性位點3’UTR-198 GA。

2.一種RRAD基因單核苷酸多態性作為牛肉質性狀分子標記的檢測方法，包括以下步驟：

第一步：采集需要檢測的牛的全血或組織樣品，用牛的全血或組織樣品進行基因組DNA提取；

第二步：根據RRAD基因序列和權利要求1中單核苷酸多態性位點SNP1所處基因的位置特征，設計合成1對特異性PCR引物如下：

RRAD-F：５’ACCCACTCACCTTTTGCTTAC３’；

RRAD-R：５’GAGTCCTCTCCCCATTCACA３’；

第三步：以牛基因組DNA為模板，使用上一步合成的引物進行PCR擴增獲得包含牛RRAD基因目的片段的PCR產物；

PCR反應體系：Taq PCR Mix 10μL，上游引物及下游引物各 0.5μL，混池DNA /個體DNA2μL，去離子水7μL，共20 μL充分混勻用于PCR擴增；PCR反應程序為：95 ℃預變性5min，95℃變性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸1 min，循環35次；延伸72℃ 10 min；4℃保存；利用瓊脂糖凝膠電泳檢查PCR擴增產物片段長度和質量，4℃或-20℃備用；第四步：采用DNA測序技術對PCR產物進行測序，使用序列分析軟件查找測序結果中RRAD基因3’非翻譯區SNP位點的位置，根據權利要求1中RRAD基因的分子標記SNP1，對檢測的牛群體或個體樣品進行基因型分析，即GG基因型、GA基因型或AA基因型，最后通過基因型評估和預測牛的胴體和肉質性狀。