[發(fā)明專利]一種麥李腋芽誘導(dǎo)及繼代增殖培養(yǎng)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010096590.8
• 申請(qǐng)日: 2020-02-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111084107A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周敬鋒;田星凱;李懿瑋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 美尚生態(tài)景觀股份有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 無(wú)錫市大為專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32104
• 代理人: 朱建均

本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種麥李腋芽誘導(dǎo)及繼代增殖培養(yǎng)方法，包括以下步驟：（1）以麥李當(dāng)年生嫩枝條為外植體，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.08%~0.12%升汞和吐溫的混合溶液對(duì)外植體進(jìn)行殺菌消毒處理；（2）將外植體接種到腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括WPM+6?BA 1.5~2.5mg/L+2、4?D 0.4~0.6 mg/L；（3）在腋芽分化、嫩枝生長(zhǎng)到2~3cm后將其切下接種到繼代增殖培養(yǎng)基上，繼代增殖培養(yǎng)基包括MS+6?BA 1.0~2.0mg/L，擴(kuò)繁增殖系數(shù)達(dá)8~12。本發(fā)明通過(guò)優(yōu)化外植體消毒處理和腋芽誘導(dǎo)、繼代增殖培養(yǎng)基配方，能在短時(shí)間內(nèi)獲得大量長(zhǎng)勢(shì)健壯的麥李無(wú)菌組培苗，擴(kuò)繁增殖率高，良品率高，組培方法易于操作，提高了繁殖速度和苗的整齊度，并提高性狀穩(wěn)定性，降低育苗成本。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種麥李腋芽誘導(dǎo)及繼代增殖培養(yǎng)方法。

技術(shù)背景

麥李，薔薇科櫻屬，落葉灌木，高達(dá)2米，葉卵狀長(zhǎng)橢圓形至橢圓狀披針形，長(zhǎng)5~8厘米，先端急尖而常圓鈍，基部廣楔形，緣有細(xì)鈍齒，兩面無(wú)毛或背面中肋疏生柔毛；葉柄長(zhǎng)4~6毫米。花粉紅或近白色，徑約2厘米，花梗長(zhǎng)約1厘米。果近球形，徑1~1.5厘米，紅色。麥李有一定耐寒性適應(yīng)性強(qiáng)，喜光，較耐寒，適應(yīng)性強(qiáng)，甚為美觀，各地庭園常見(jiàn)栽培觀賞宜于草坪、路邊、假山旁及林緣叢栽，也可作基礎(chǔ)栽植、盆栽或催花、切花材料。生于山坡、溝邊或灌叢中，也有庭園栽培，海拔800~2300米，分布于中國(guó)和日本，有很高的園藝觀賞價(jià)值。常用分株或嫁接法繁殖，砧木用山桃，扦插繁殖，主要夏季半成熟枝插易成活，但是成活率不高，優(yōu)質(zhì)商品苗少。近年來(lái)，隨著植物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展與成熟，組織培養(yǎng)成為快速大量繁殖苗木、獲得性狀整齊生長(zhǎng)健壯的商品苗的首選技術(shù)手段。各類植物的組織培養(yǎng)體系亟待開(kāi)發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種麥李腋芽誘導(dǎo)及繼代增殖培養(yǎng)方法。本發(fā)明通過(guò)優(yōu)化外植體消毒處理和腋芽誘導(dǎo)、繼代增殖培養(yǎng)基配方，能在短時(shí)間內(nèi)獲得大量長(zhǎng)勢(shì)健壯的麥李無(wú)菌組培苗，擴(kuò)繁增殖率高，良品率高，組培方法易于操作，提高了繁殖速度和苗的整齊度，并提高性狀穩(wěn)定性，降低育苗成本，從而為建立高效的麥李快速繁殖工廠化生產(chǎn)體系奠定基礎(chǔ)，也對(duì)麥李種質(zhì)資源離體保存具有重要意義。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種麥李腋芽誘導(dǎo)及繼代增殖培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）外植體消毒處理：選取當(dāng)年生嫩枝條為外植體，去除外植體的葉片，洗去表面雜質(zhì)，切去傷口位置，對(duì)外植體進(jìn)行消毒，將消毒完的外植體切成小段接種到配制好的培養(yǎng)基上培養(yǎng)觀察5~9天；

（2）腋芽的誘導(dǎo)：將切成小段的無(wú)菌外植體接種到腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，7~15天后，腋芽部位開(kāi)始膨大，出現(xiàn)綠色突起，15~25天后腋芽分化生長(zhǎng)，再培養(yǎng)15~25天，小的嫩枝條長(zhǎng)到2~3cm，將嫩枝條切下轉(zhuǎn)入嫩枝條繼代增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)，確保嫩枝條生長(zhǎng)迅速且無(wú)玻璃化等不良現(xiàn)象，在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)發(fā)育良好；

（3）繼代增殖培養(yǎng)：將誘導(dǎo)的嫩枝條接種到繼代增殖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)25~30天后篩選出無(wú)根、側(cè)枝多、增殖系數(shù)較高的增殖母苗，其擴(kuò)繁增殖系數(shù)達(dá)8~12。

所述外植體消毒時(shí)采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.08%~0.12%的升汞和吐溫的混合溶液，浸泡消毒時(shí)間6~10分鐘，無(wú)菌水沖洗4~6次。

所述腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括WPM+6-BA 1.5~2.5mg/L+2、4-D 0.4~0.6 mg/L。

所述繼代增殖培養(yǎng)基包括 MS+6-BA 1~2mg/L。

所述腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基和繼代增殖培養(yǎng)基還包括蔗糖26~30g/L、瓊脂粉4~6g/L，培養(yǎng)基pH為5.8~6.2，培養(yǎng)溫度22~26℃，光照1500~3500lx。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：