[發(fā)明專利]一株暗灰鏈霉菌及其在蛋白水解酶生產(chǎn)中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010095218.5
• 申請日: 2020-02-14
• 公開（公告）號: CN111088199B
• 公開（公告）日: 2021-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳敬;顏正飛;秦琴
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/52;C12P21/06;C12R1/465
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

本發(fā)明公開了一株暗灰鏈霉菌及其在蛋白水解酶生產(chǎn)中的應(yīng)用，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域以及發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明篩選出了一種暗灰鏈霉菌T20，此暗灰鏈霉菌T20可高效降解蛋白，將此暗灰鏈霉菌T20涂布于含有1g/L大米蛋白的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)48h，即可使固體培養(yǎng)基的透明圈直徑高達25mm。本發(fā)明篩選出了一種暗灰鏈霉菌T20，此暗灰鏈霉菌T20可高產(chǎn)氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的蛋白水解酶，將此暗灰鏈霉菌T20接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵48h，即可使發(fā)酵上清液中的蛋白水解酶酶活高達1500U/mL。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株暗灰鏈霉菌及其在蛋白水解酶生產(chǎn)中的應(yīng)用，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域以及發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

大米蛋白是公認的優(yōu)質(zhì)蛋白，相對于大豆蛋白、乳清蛋白等蛋白而言，其營養(yǎng)抑制因子含量少，無過敏反應(yīng)，包含人體所需氨基酸，氨基酸配比合理，且生物價遠超大豆蛋白，可與蝦及牛肉等的生物價相媲美，符合世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的理想模式。大米蛋白水解成短肽后，還可以制成營養(yǎng)價值更高的短肽營養(yǎng)液，作為高價值添加劑運用于保健品、飲料、化妝品等行業(yè)。

在大米肽中，分子量小于1000Da的統(tǒng)稱為“小分子肽”，小分子肽可被人體小腸迅速吸收，不僅不會引起營養(yǎng)過剩等副作用，而且，一些特定的小分子肽還具有獨特的生理功能，例如，具有抗氧化能力(具體可見參考文獻：Yan et al.,Food Chemistry,2015,179:290-295)、改善仔豬腸道菌群(具體可見參考文獻：楊亞強.,南昌大學(xué)[M],2018)、具有血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制活性(具體可見參考文獻：Wang et al.,LWT-Food SciTechnology,2017,75:93-99)以及具有抗癌活性(具體可見參考文獻：Kannan et al.,TheOpen Bioactive Compounds Journal,2009,2:17-20)等，故而小分子肽含量是大米肽品質(zhì)的關(guān)鍵指標，提升小分子肽含量可大大提升大米肽產(chǎn)品的市場競爭力。

目前，小分子肽的制備方法主要有酶解法、微生物發(fā)酵法、酸堿解法、化學(xué)合成法等，其中，酶解法是工業(yè)上可行，安全性高，而且綠色環(huán)保的一種方法。但是，現(xiàn)有的酶解法仍具有許多缺陷，例如，公開號為CN1102229643A的專利中所記載的制備方法可使所得大米肽產(chǎn)品中的小分子肽含量高達50％左右，但其在制備過程中需采用多種酶制劑協(xié)同酶解，并且，其需要使用中空纖維膜，這大大延長了大米肽產(chǎn)品的生產(chǎn)周期，增加了大米肽產(chǎn)品的工業(yè)生產(chǎn)成本；公開號為CN103440949A的專利則先采用粉碎、調(diào)漿、洗滌、調(diào)漿、反應(yīng)、濃縮、脫水等步驟對大米米渣進行預(yù)處理，然后再采用多種蛋白水解酶協(xié)同處理經(jīng)預(yù)處理的大米米渣，但是，此方法主要以預(yù)處理方式提高大米肽產(chǎn)品中的小分子肽含量，其酶解過程前后，大米肽產(chǎn)品中的小分子肽含量變化不顯著，并且，此方法制備步驟繁瑣、能耗大、加酶量大，不利于工業(yè)化進程。

因此，急需找到一種制備工藝簡單、制備周期短、成本低且制備得到的大米肽中小分子肽含量高的制備大米肽的方法以克服上述缺陷。

發(fā)明內(nèi)容

[技術(shù)問題]

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種制備工藝簡單、制備周期短、成本低且制備得到的大米肽中小分子肽含量高的制備大米肽的方法。

[技術(shù)方案]

為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種暗灰鏈霉菌(Streptomyces canus)T20，所述暗灰鏈霉菌(Streptomyces canus)T20已于2019年11月15日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO:M2019936，保藏地址為中國武漢，武漢大學(xué)。