[發明專利]一種HMW-GS全缺失糯小麥的創制方法

在審

• 申請號: 202010094076.0
• 申請日: 2020-02-15
• 公開（公告）號: CN111183894A
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 顏澤洪;代壽芬;劉登才;劉剛;李健;魏育明;鄭有良
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02
• 代理公司: 成都方圓聿聯專利代理事務所(普通合伙) 51241
• 代理人: 宋紅賓

本發明公開了一種HMW?GS全缺失糯小麥的創制方法，包括如下步驟：(1)將HMW?GS全缺失小麥和糯小麥人工雜交，獲得雜交F₁種子；(2)種植雜交F₁種子，自交收獲F₂種子并分單粒，篩選出3個Wx基因位點均不表達Waxy蛋白的單粒糯小麥；單粒糯小麥再刮取胚乳粉末用于SDS?PAGE鑒定HMW?GS組成，從中篩選出不表達任何HMW?GS的單粒種子，該單粒種子即為HMW?GS全缺失的糯小麥；(3)將HMW?GS全缺失的糯小麥單粒種子種植，自交收獲F₃種子，連續分單粒種植并自交到F₅，分單株種植，F₆穩定后測定品質指標。

技術領域

本發明屬于植物生物技術領域，尤其涉及一種自然界天然不存在的HMW-GS全缺失糯小麥的創制方法。

背景技術

小麥胚乳內淀粉和高分子量谷蛋白(High molecular weight gluteninsubunits，HMW-GS)組成和含量是影響小麥面粉加工品質的重要因素。

普通小麥胚乳中淀粉含量占籽粒總重量的70％左右，分為直鏈和支鏈兩種，二者在總淀粉中的比例相對穩定，約為25％和75％(翟紅梅等，2008)。小麥顆粒淀粉結合酶I，也稱GBSSI，直接決定小麥直鏈淀粉的合成、含量以及直鏈/支鏈淀粉比例(Vrinten andNakamura 2000)。編碼該酶蛋白的基因也稱為Wx，分別位于7AS，4AL和7DS上的Wx-A1，Wx-B1和Wx-D1位點(Yan and Bhave，2000；Yan et al，2000)，其對應產物為Waxy蛋白，普通小麥缺失1-2個Waxy蛋白的稱為部分糯小麥，3個同時缺失的稱為糯小麥，糯小麥直鏈淀粉含量很低(1％)，甚至不含直鏈淀粉，幾乎全為支鏈淀粉。自然界天然存在的小麥中，缺失Wx-B1蛋白的很常見，缺失Wx-A1蛋白的較少，而缺失Wx-D1蛋白的非常罕見，Waxy蛋白雙缺失型以Wx-A1和Wx-B1蛋白同時缺失較常見，幾乎沒有其余雙缺失型以及三缺失型(糯小麥)(姚金保等，2004；譚彩霞等，2010)。現有糯小麥都是通過人工雜交，聚合沉默的Wx基因(不產生Waxy蛋白)選育的(Nakamura et al.1995；劉廣田等，2000；李中安和寧錕2001；李繼剛等，2001；姚大年等，2002；張鳳琴等，2017)。糯小麥對改良小麥品質有重要作用。Wx-B1缺失的部分糯小麥(Epstein et al.2002)或者添加一定比例的糯小麥面粉有利于改良面條品質(劉愛峰等，2017)。普通小麥添加20％的糯小麥能顯著延遲面包變硬，增加面包貨架期(Bhattacharya et al.2002)。糯小麥也可以改良饅頭品質(高新樓等，2015)，提高釀酒品質(趙國君等,2013)。