[發明專利]一種調節生豬腸道菌群的微生物制劑及制備方法

在審

• 申請號: 202010093360.6
• 申請日: 2020-02-14
• 公開（公告）號: CN111172077A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 莫艷華;姚康;馬國華;黃海紅
• 申請（專利權）人: 廣東中科無抗養殖科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/18;C12N1/16;A23K50/30;A23K10/12;A23K10/30;A23K10/37;A23K10/33;C12R1/23;C12R1/225;C12R1/01;C12R1/865;C12R1/72;C12R1/125
• 代理公司: 廣東廣信君達律師事務所 44329
• 代理人: 江間開

1.一種調節生豬腸道菌群的微生物制劑的制備方法，其特征在于包含如下步驟：

(1)菌種活化培養：將冷凍保藏的嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus)、動物雙歧桿菌(Bifidobacterium)、釀酒酵母(Saccharomy cescerevisiae)、產朊假絲酵母(Candidautilis)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)分別進行多次活化，得到嗜酸乳桿菌、保加利亞乳桿菌、動物雙歧桿菌、釀酒酵母、產朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌活化菌種；

(2)液體菌種培養

①將步驟(1)制得的嗜酸乳桿菌和保加利亞乳桿菌活化菌種等質量比混合接種于液體培養基中，37℃兼性厭氧培養2～3天，得到乳酸菌種子液；

②將步驟(1)制得的動物雙歧桿菌活化菌種接種于液體培養基中，37℃厭氧培養2～3天，得到動物雙歧桿菌種子液；

③將步驟(1)制得的釀酒酵母和產朊假絲酵母活化菌種等質量比混合接種于液體培養基中，搖床轉速150～200r/min、溫度28～30℃培養2天，得到酵母菌種子液；

④將步驟(1)制得的枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌活化菌種等質量比混合接種于液體培養基中，搖床轉速150～200r/min、溫度30～35℃培養1～2天，得到芽孢桿菌種子液；

(3)復合微生物制劑菌種培養：將步驟(2)制得的酵母菌種子液和芽孢桿菌種子液接種于已滅菌的發酵培養基中，搖床轉速150～200r/min、溫度30℃培養1～2天，然后將步驟(2)制得的乳酸菌種子液和動物雙歧桿菌種子液同時接種至上述發酵體系中，37℃厭氧培養3～5天，得到復合微生物制劑菌種；其中，乳酸菌種子液、動物雙歧桿菌種子液、酵母菌種子液和芽孢桿菌種子液的質量比為5:2:4:3，總接種量為重量百分比10％；

(4)成品培養：將步驟(3)制得的復合微生物制劑菌種按重量百分比5～8％接種至發酵培養基中，28～30℃密閉發酵7～15天，得到調節生豬腸道菌群的微生物制劑；其中，該步驟發酵培養基不用滅菌。

2.根據權利要求1所述的調節生豬腸道菌群的微生物制劑的制備方法，其特征在于：

步驟(1)中所述的嗜酸乳桿菌、保加利亞乳桿菌、動物雙歧桿菌、釀酒酵母、產朊假絲酵母、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌株分別為嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)CICC 6086、保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus)ACCC 03958、動物雙歧桿菌(Bifidobacterium animalis)CICC 6174、釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CICC 1355、產朊假絲酵母(Candida utilis)CICC 31170、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)CICC 24434、地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)CGMCC1.10257。

3.根據權利要求1所述的調節生豬腸道菌群的微生物制劑的制備方法，其特征在于：

步驟(3)中所述的發酵培養基包含如下按質量百分比計的組分：

工業用廢糖蜜5％、酵母粉0.5％、蛋白胨1％、香蕉多糖0.3％、氯化銨0.2％、氯化鈉0.05％、磷酸二氫鉀0.1％、硫酸鎂0.05％、硫酸鋅0.025％、硫酸亞鐵0.025％、余量為弱堿性小分子還原水補至100％。

4.根據權利要求1所述的調節生豬腸道菌群的微生物制劑的制備方法，其特征在于：

步驟(4)中所述的發酵培養基包含如下按質量百分比計的組分：

工業用廢糖蜜5～8％、香蕉多糖0.3％、氯化銨0.2％、氯化鈉0.05％、磷酸二氫鉀0.1％、硫酸鎂0.05％、硫酸鋅0.025％、硫酸亞鐵0.025％，弱堿性小分子還原水補至100％。

5.一種調節生豬腸道菌群的微生物制劑，其特征在于通過權利要求1～4任一項所述的制備方法制備得到。