[發(fā)明專利]一種用于生豬防疫的復(fù)合微生態(tài)菌劑及其制備方法與應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010093354.0 | 申請日： | 2020-02-14 |
| 公開（公告）號： | CN111281898A | 公開（公告）日： | 2020-06-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 莫艷華;姚康;馬國華;黃海紅 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣東中科無抗養(yǎng)殖科技有限公司 |
| 主分類號： | A61K36/064 | 分類號： | A61K36/064;A61P31/04;A61P37/04;C12N1/20;C12N1/18;C12R1/23;C12R1/02;C12R1/865;C12R1/125;C12R1/38;A61K35/747;A61K35/742;A61K35/741;A61K35/74 |
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| 地址： | 510700 廣東省廣州*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 生豬 防疫 復(fù)合 生態(tài) 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種用于生豬防疫的復(fù)合微生態(tài)菌劑，其特征在于由嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)、巴氏醋桿菌(Acetobacter pasteurianus)、釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)和沼澤紅假單胞菌(Rhodop seudanonaspalustris)的種子液按照質(zhì)量比為5:5:4:3:3混合培養(yǎng)后，進一步發(fā)酵培養(yǎng)得到。
2.權(quán)利要求1所述的用于生豬防疫的復(fù)合微生態(tài)菌劑的制備方法，其特征在于包含如下步驟：
(1)菌種活化培養(yǎng)：將冷凍保藏的嗜酸乳桿菌、巴氏醋桿菌、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌和沼澤紅假單胞菌分別進行多次活化，得到嗜酸乳桿菌、巴氏醋桿菌、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌活化菌種；
(2)液體菌種培養(yǎng)
①將步驟(1)制得的嗜酸乳桿菌活化菌種接種于液體培養(yǎng)基中，37℃兼性厭氧培養(yǎng)2～3天，得到嗜酸乳桿菌種子液；
②將步驟(1)制得的巴氏醋桿菌活化菌種接種于液體培養(yǎng)基中，搖床轉(zhuǎn)速200r/min、溫度30℃培養(yǎng)1-2天，得到巴氏醋桿菌種子液；
③將步驟(1)制得的釀酒酵母活化菌種接種于液體培養(yǎng)基中，搖床轉(zhuǎn)速150r/min、溫度28℃培養(yǎng)2天，得到釀酒酵母種子液；
④將步驟(1)制得的枯草芽孢桿菌活化菌種接種于液體培養(yǎng)基中，搖床轉(zhuǎn)速200r/min、溫度35℃培養(yǎng)1～2天，得到枯草芽孢桿菌種子液；
⑤將步驟(1)制得的沼澤紅假單胞菌活化菌種接種至液體培養(yǎng)基中，60瓦烏絲燈光照30～35℃厭氧培養(yǎng)5～7天，得到沼澤紅假單胞菌種子液；
(3)復(fù)合菌種培養(yǎng)：將步驟(2)制得的巴氏醋桿菌種子液、釀酒酵母菌種子液和枯草芽孢桿菌種子液接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中，30℃搖床轉(zhuǎn)速150～200r/min培養(yǎng)1～2天，然后再接種嗜酸乳桿菌種子液和沼澤紅假單胞菌種子液，30～35℃厭氧培養(yǎng)3～5天，得到復(fù)合菌種；其中，嗜酸乳桿菌、巴氏醋桿菌、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌和沼澤紅假單胞菌的質(zhì)量比為5:5:4:3:3，總接種量為重量百分比10％；
(4)成品培養(yǎng)：將步驟(3)制得的復(fù)合菌種按重量百分比5～8％接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中，28～30℃密閉發(fā)酵7～15天，得到用于生豬防疫的復(fù)合微生態(tài)菌劑，其中，該步驟發(fā)酵培養(yǎng)基不用滅菌。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于生豬防疫的復(fù)合微生態(tài)菌劑的制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的嗜酸乳桿菌、巴氏醋桿菌、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌和沼澤紅假單胞菌的菌株分別為嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)CICC6088、巴氏醋桿菌(Acetobacter pasteurianus)CICC 20056、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CICC1251、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)CICC24434和沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudanonas palustris)CICC 23812。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于生豬防疫的復(fù)合微生態(tài)菌劑的制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的多次活化的具體操作為：
將冷凍保藏的嗜酸乳桿菌、巴氏醋桿菌、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌和沼澤紅假單胞菌分別進行三次斜面活化，然后再進行平板純化培養(yǎng)，最后進行斜面培養(yǎng)，得到嗜酸乳桿菌、巴氏醋桿菌、釀酒酵母、枯草芽孢桿菌和沼澤紅假單胞菌活化菌種。
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