[發明專利]一種從甜菊糖母液中提取萊包迪苷D和萊包迪苷M的方法

有效

• 申請號: 202010092863.1
• 申請日: 2020-02-14
• 公開（公告）號: CN111187316B
• 公開（公告）日: 2021-06-15
• 發明（設計）人: 江偉;魏士明;李俊;孫平;任連兵
• 申請（專利權）人: 南京全凱生物基材料研究院有限公司
• 主分類號: C07H15/256
• 分類號: C07H15/256;C07H1/08
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 胡建華

本發明公開了一種從甜菊糖母液中提取萊包迪苷D和萊包迪苷M的方法，其是將甜菊糖母液上樣到含有固相吸附材料的色譜分離柱中，用洗脫液洗脫，收集洗脫液，將洗脫液合并，蒸發結晶，即得萊包迪苷D和萊包迪苷M的混合物；其中，所述的固相吸附材料是以苯乙烯?二乙烯苯共聚物為骨架結構；所述的固相吸附材料的粒徑為5～30μm，比較面積為400～1000m²/g，孔徑為80～1000A，孔容為0.6～1.2cm³/g。該方法工藝過程簡單，分離效率高、工藝廢液低。所得萊包迪苷D和萊包迪苷M產品純度在95％以上。

技術領域

本發明屬于生物基原材料分離純化技術領域，具體涉及一種從甜菊糖母液中提取萊 包迪苷D和萊包迪苷M的方法。

背景技術

甜葉菊原產于巴西和巴拉圭交界的高山草地，當地人使用甜葉菊作為甜茶或者甜味 劑。我國1976年將甜葉菊引入，并且成功種植。目前我國福建、云南為甜葉菊種植地， 每年種植大量的甜葉菊。

甜菊糖苷是多種結構相似的二萜類化合物。常溫下呈白色粉末狀，極易溶于水、乙醇。具有很好的穩定性。目前是繼蔗糖、甜菜糖外的“世界第三糖原”。同時其甜度高 (約為蔗糖的150～300倍)、熱量低(約為蔗糖的1/300)。針對高血壓、糖尿病、肥胖 病等病患者具有一定的輔助治療作用。且未發現其具有任何毒性和副作用。目前歐盟委 員會已經允許甜菊糖為食品添加劑。甜菊糖已經廣泛應用于食品飲料、醫藥等行業。

當前廣泛應用的甜菊糖苷有甜菊苷(STV)和萊包迪苷A(RA)也是甜菊葉成分最 高的組分。雖然STV和RA具有相當高的甜度，但是其口感上存在一定的后苦味。有研 究表明萊包迪苷D(RD)和萊包迪苷M(RM)具有更好的口感，同時添加一定比例的 萊包迪苷D和萊包迪苷M可以很好的改善STV和RA的后苦味和風味。

專利CN 107404919 A日本守田化學工業株式會社提供一種甜味劑組合物，在RA中添加一定比例的RD和RM作為活性成分。最終得到甜味品質接近食用糖的優良的天 然甜味劑。專利CN 109219355 A可口可樂公司使用萊包迪苷M改善甜味劑，使得甜味 劑屬性更接近于蔗糖甜味。

綜上所述，使用萊包迪苷D和萊包迪苷M作為甜味調節劑已經被廣泛的驗證。但 是從甜菊糖母液中分離純化萊包迪苷D和萊包迪苷M的技術仍然不成熟，造成甜菊糖 作為甜味劑的局限性。

目前國際上主要還是針對STV和RA等組分的分離純化方法的研究。我國大部分甜菊苷生產企業也只是利用大孔吸附樹脂初步的提取STV和RA。然而吸附后甜菊糖母液 糖(提取STV和RA后的母液糖)中含有萊包迪苷D和萊包迪苷M。目前并沒有很好 處理方法，往往將母液糖直接當廢棄物排掉。這就造成的資源的極大浪費，同時也造成 的環境的污染。

針對以上情況有研究者對RD和RM的分離做了一定的工作。專利CN 103709215 B一種從甜菊糖結晶母液糖中提取萊包迪苷D的方法，通過一次結晶，固液分離得到50％ 左右的RD產品。專利CN 102060892 B甜菊糖苷RD的提純方法使用大孔吸附樹脂吸 附分離RD，可得到純度40％以上的RD產品，后續需要通過精制可得到純度95％的RD 產品。專利CN102796152 A制取高Reb-D甜菊糖苷的方法，使用多柱二次樹脂串聯吸 附提純甜菊糖苷，其中使用到預處理、脫鹽、吸附、解吸附、脫色、離子交換、納濾、 結晶等工藝最終得到高純度的萊包迪苷D產品，其中萊包迪苷純度80％以上。專利 CN108864222A一種高純度甜菊糖苷RD和RM的制備方法，使用非極性吸附樹脂Super 200-X19對甜菊糖母液處理，分離純化得到RD和RM產品。

以上的研究方法都存在一定的局限性：1、重結晶的方法需使用大量的有機溶劑，且 過程繁瑣，能耗較大不利于工業放大；2、大孔吸附樹脂只能得到相對純度的萊包迪苷 D和萊包迪苷M產品，同時里面還含有其他甜菊糖苷成分，同時多柱串聯對產地、設 備需求過大，一次投入高；3、RA、STV、RD、RM結構相似，單一非極性吸附樹脂色 譜分離技術很難做到高純度單一分離。