[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的抗菌組合物及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010090761.6
• 申請(qǐng)日: 2020-02-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111235086A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蘭韜;吳琦;趙琳;云振宇;劉文;張曉芳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/00
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/00
• 代理公司: 北京元本知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11308
• 代理人: 蘭渝宏

本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的抗菌組合物及其應(yīng)用。本發(fā)明所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)的抗菌組合物，其特征在于，所述抗菌組合物的有效成分為鯰魚(yú)體表黏液，所述體表黏液包括鯰魚(yú)體表抗菌多肽和活性多糖。其中所述鯰魚(yú)體表抗菌多肽有殺菌防止細(xì)菌感染的作用，所述肽類(lèi)物質(zhì)和活性多糖有為細(xì)胞培養(yǎng)提供必要營(yíng)養(yǎng)的作用，二種成分協(xié)同發(fā)揮作用。

該申請(qǐng)將可能作為后續(xù)專(zhuān)利申請(qǐng)(包括，但不限于，中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)、中國(guó)實(shí)用新型申請(qǐng)、PCT申請(qǐng)、基于巴黎公約的國(guó)外申請(qǐng))的優(yōu)先權(quán)基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種抗菌組合物及在細(xì)胞培養(yǎng)抗菌中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前常見(jiàn)的細(xì)胞培養(yǎng)方式包括貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)等三種，其中懸浮培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)由于培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，很容易產(chǎn)生染菌，造成操作的困難及時(shí)間和金錢(qián)的浪費(fèi)。目前最常用的防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中染菌的方法是在培養(yǎng)液中添加抗生素–例如，目前常用的細(xì)胞培養(yǎng)抗生素有青霉素、鏈霉素、慶大霉素、四環(huán)素、紅霉素等，但通常每種抗生素只能對(duì)抗某一種細(xì)菌，如青霉素、鏈霉素聯(lián)合抑制細(xì)菌，即所謂的“雙抗”，主要針對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、陰性菌。對(duì)于細(xì)菌的感染也可用慶大或卡那霉素。如果真菌污染嚴(yán)重，可用兩性霉素/制霉菌素控制；若為支原體污染，可用慶大霉素/四環(huán)素/紅霉素的聯(lián)合抗生素

但是在細(xì)胞培養(yǎng)中采用抗生素存在一定的潛在危害：經(jīng)常使用抗生素，可能會(huì)造成細(xì)菌耐受，甚至誘導(dǎo)出新型細(xì)菌。且廢棄物中的抗生素如果隨意丟棄在環(huán)境中，將造成嚴(yán)重的污染。同時(shí)抗生素的研發(fā)進(jìn)度遠(yuǎn)不及新菌的演化速度，將來(lái)很可能造成細(xì)菌感染而無(wú)藥可用。因此，需要研究和應(yīng)用無(wú)毒、無(wú)公害、無(wú)耐藥的新型抗菌劑替代抗生素。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種新型的用于細(xì)胞培養(yǎng)的抗菌組合物。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下。

一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的抗菌組合物，所述抗菌組合物的有效成分為鯰魚(yú)體表黏液；所述鯰魚(yú)體表黏液的組成包括鯰魚(yú)體表抗菌多肽和活性多糖；所述鯰魚(yú)體表抗菌多肽的分子量為2000-30000，所述活性多糖的分子量為2000-30000。

進(jìn)一步，所述鯰魚(yú)的種類(lèi)包括大口鯰、昆明鯰或胡子鯰中的一種或多種。

本發(fā)明所述的抗菌組合物是一種廣譜抗菌物質(zhì)，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌引起的感染均有抑制效果，可以抑制的細(xì)菌包括但不限于金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌。

進(jìn)一步，所述抗菌組合物還包括乙醇、甘油和和水，所述乙醇為100-400份，所述甘油為10-50份，所述水為500-1000份。

作為一種優(yōu)選，所述乙醇為100-200份，所述甘油為10-30份，所述水為600-900份。

本發(fā)明所述的乙醇和水是溶劑，甘油是增稠劑。通過(guò)特定的配比，可以達(dá)到使鯰魚(yú)體表抗菌多肽和活性多糖分子充分溶解，同時(shí)稠度恰當(dāng)，使整個(gè)抗菌組合物的穩(wěn)定性較高，便于后續(xù)用于細(xì)胞培養(yǎng)。

本發(fā)明的目的還在于提供上述抗菌組合物的應(yīng)用。

上述抗菌組合物在制備細(xì)胞培養(yǎng)抗菌劑中的應(yīng)用。

進(jìn)一步，所述抗菌組合物可以用于制備細(xì)胞懸浮培養(yǎng)和/或細(xì)胞固定化培養(yǎng)的抗菌劑。

在日常實(shí)驗(yàn)操作中，細(xì)胞懸浮培養(yǎng)和細(xì)胞固定化培養(yǎng)容易染菌，因此常添加抗生素，但抗生素的使用具有一定的潛在風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明的抗菌組合物特別適用于上述兩種細(xì)胞培養(yǎng)方式，與添加抗生素相比更安全。本發(fā)明研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)在實(shí)驗(yàn)室里摸索發(fā)現(xiàn)添加1％-10％的劑量范圍具有最好的抑菌效果。

本發(fā)明的目的還在于提供一種含有上述抗菌組合物的抗菌劑的制備方法。

一種細(xì)胞培養(yǎng)抗菌劑的制備方法，包括如下步驟：