[發明專利]一種用于檢測ONOO-

在審

• 申請號: 202010089405.2
• 申請日: 2020-02-12
• 公開（公告）號: CN111349071A
• 公開（公告）日: 2020-06-30
• 發明（設計）人: 尤進茂;陸姣;李贊;譚江坤;孫志偉;常芮
• 申請（專利權）人: 曲阜師范大學
• 主分類號: C07D311/82
• 分類號: C07D311/82;C09K11/06;G01N21/64;G01N21/78
• 代理公司: 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙) 11531
• 代理人: 崔建章

1.一種用于檢測ONOO^-的氧雜蒽衍生物，其特征在于，以9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-1,2,3,4-四氫夾氧雜蒽為熒光基團，以活化的C＝C雙鍵為反應活性基團；該氧雜蒽衍生物優選為9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-4(4-苯亞甲基)-1,2,3,4-四氫夾氧雜蒽，其化學結構式為：

2.一種根據權利要求1所述的用于檢測ONOO^-的氧雜蒽衍生物的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將濃硫酸置入容器中，再加入環己酮和2-[(4-二乙胺基)-2羥基苯甲酰]苯甲酸，(70-90)℃進行反應，反應結束，待溶液冷卻到室溫，倒入冰水中，攪拌均勻，然后向混合液體中滴加高氯酸，析出固體，得到中間產物F₃₇₆，F₃₇₆為9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-1,2,3,4-四氫夾氧雜蒽；

(2)將步驟(1)得到的中間產物F₃₇₆溶解于無水乙醇中，加入4-甲氧基苯甲醛，在(60-90)℃下攪拌回流后，冷卻至室溫后，將濾液旋干，通過層析柱方法得到最終產物F₄₉₄，F₄₉₄為9-(2-羧苯基)-6(二乙氨基)-4(4-苯亞甲基)-1,2,3,4-四氫夾氧雜蒽。

3.根據權利要求2所述的用于檢測ONOO^-的氧雜蒽衍生物的合成方法，其特征是：上述合成方法的具體工藝為：

在步驟(1)中，

2-[(4-二乙胺基)-2羥基苯甲酰]苯甲酸與環己酮的摩爾比優選為1:2，

反應時間優選為2h，

加樣順序優選為：先加濃硫酸，冰水浴中先攪拌5分鐘，然后加入環己酮，0℃繼續攪拌5分鐘，最后再加入2-[(4-二乙胺基)-2羥基苯甲酰]苯甲酸，然后升溫至(70-90)℃。

4.根據權利要求2所述的用于檢測ONOO^-的氧雜蒽衍生物的合成方法，其特征是：上述合成方法的具體工藝為：

在步驟(2)中，

中間產物F₃₇₆與4-甲氧基苯甲醛的摩爾比優選為1：2，

(60-90)℃下的攪拌回流時間優選為2h。

5.一種用于檢測ONOO^-的氧雜蒽衍生物的應用，其特征在于，所述氧雜蒽衍生物具有如權利要求1所述的結構或者通過權利要求2-4任一項所述的方法制備，作為分子探針應用于檢測ONOO^-的總含量、檢測細胞外源性ONOO^-濃度或細胞內源性ONOO^-濃度及細胞ONOO^-熒光成像。

6.根據權利要求5所述的用于檢測ONOO^-的氧雜蒽衍生物的應用，其特征是：所述細胞內源性ONOO^-濃度檢測是通過添加LPS+PMA藥物誘導，使細胞自己生成的ONOO^-；所述細胞外源性ONOO^-濃度檢測是通過外部添加ONOO^-，最終被細胞吸收；所述熒光成像是對細胞內的ONOO^-成像。