[發(fā)明專利]一種從大豆卵磷脂中提取分離α-GPC的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010087011.3
• 申請日: 2020-02-11
• 公開（公告）號: CN111378702B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發(fā)明（設計）人: 趙勇彪;李佳蓮;危志剛;易娜
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南中茂生物科技有限公司
• 主分類號: C12P13/00
• 分類號: C12P13/00
• 代理公司: 廣州正明知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 44572
• 代理人: 成姍

本發(fā)明屬于甘油磷脂酰膽堿的制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從大豆卵磷脂中提取分離α?GPC的方法，為提供一種適用于大規(guī)模生產(chǎn)α?GPC的新工藝，提高α?GPC的得率和轉(zhuǎn)化率，并縮短其反應時間，本發(fā)明提供一種從大豆卵磷脂中提取分離α?GPC的方法，將大豆卵磷脂添加到水?有機溶劑混合體系中，然后加入氯化鈷、氯化錳、磷脂酶A1、磷脂酶A2和脂肪酶Bakezyme?LFP，混勻后置于多頻超聲?微波協(xié)同處理下經(jīng)反應后制備得到，α?GPC得率和反應時間的統(tǒng)計實驗表明，采用本發(fā)明方法制備α?GPC，α?GPC的得率和轉(zhuǎn)化率均較高，而且反應時間短，可以大大縮短α?GPC的提取時間，適用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于甘油磷脂酰膽堿的制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從大豆卵磷脂中提取分離α-GPC的方法。

背景技術(shù)

α-甘油磷脂酰膽堿(α-Glycerylphosphorylcholine，α-GPC)又稱甘油磷酸膽堿、甘磷酸膽堿，是動物體內(nèi)天然存在的水溶性磷脂代謝產(chǎn)物，經(jīng)口服后，能到達膽堿突觸末梢并增加乙酰膽堿的合成和釋放。α-GPC不僅可以作為保健品，促進大腦中乙酰膽堿和磷脂酰膽堿的生物合成，提高人的記憶能力和認知能力，也能有效治療老年癡呆類疾病如阿爾茨海默病，被醫(yī)藥界稱為“大腦的防衰老營養(yǎng)素”。α-GPC還可以保護肝臟，抵抗高脂蛋白的脂肪滲透，起到抗類風濕、抗高血脂和抗動脈硬化的作用。另外α-GPC在一定程度上能夠增強人體肌肉力量，提高反應敏捷度。目前，國內(nèi)外有關(guān)α-GPC的制備主要有直接萃取法、化學合成法和甲醇鈉催化醇解法。隨著生物酶技術(shù)在醫(yī)藥工業(yè)和食品工業(yè)中的廣泛應用，近年來出現(xiàn)了酶法制備α-GPC。

近年來，雖然α-GPC的制備取得了不錯的進展，但目前國內(nèi)有關(guān)α-GPC制備的技術(shù)均不是十分成熟，仍普遍存在α-GPC的得率和轉(zhuǎn)化率低、反應時間長等缺陷，難以滿足大規(guī)模生產(chǎn)α-GPC的要求。由于醫(yī)藥、食品、保健品等領(lǐng)域?qū)Ζ?GPC都具有很大的需求，并且在未來將有更大的市場。所以研發(fā)適用于大規(guī)模生產(chǎn)α-GPC的新工藝，提高α-GPC的得率，并縮短其反應時間具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種從大豆卵磷脂中提取分離α-GPC的方法，該方法不僅可以提高α-GPC的得率和轉(zhuǎn)化率，而且可以大大縮短α-GPC的提取時間，適用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：

本發(fā)明提供一種從大豆卵磷脂中提取分離α-GPC的方法，包括以下步驟：

S1、將大豆卵磷脂添加到水-有機溶劑混合體系中，經(jīng)攪拌混勻后制備得到反應混合液A，所述有機溶劑為親水性有機溶劑；

S2、往反應混合液A中加入氯化鈷和氯化錳，經(jīng)均質(zhì)處理后制備得到反應混合液B；

S3、往反應混合液B中加入磷脂酶A1、磷脂酶A2和脂肪酶Bakezyme?LFP，經(jīng)混勻后制備得到反應混合液C；

S4、將反應混合液C的pH調(diào)節(jié)至6.0-7.0，然后將其置于多頻超聲-微波協(xié)同處理下進行反應，最后經(jīng)分離得到α-GPC。

大豆卵磷脂中含有疏水性的脂肪酸鏈和親水基團(磷酸基、膽堿式乙醇胺)，將水相介質(zhì)與親水性有機溶劑混合，可以增加底物的溶解度，有利于反應的平衡向產(chǎn)物合成方向移動，不僅可以縮短反應的時間，而且可以提高α-GPC的得率；脂肪酶Bakezyme?LFP與磷脂酶A1、磷脂酶A2復配，可以提高脫酰基的效率，加快中間產(chǎn)物酰基轉(zhuǎn)移的速率，從而縮短了反應體系所用的時間，并提高底物的利用率和產(chǎn)品的得率；氯化鈷和氯化錳的加入可以提高酶的催化活性，加快反應的進度，從而縮短了反應體系所用的時間；采用多頻超聲-微波協(xié)同處理反應體系時，可以使體系迅速發(fā)生乳化，促進了底物的分散，迅速增大反應界面，從而促使反應速度加快，并提高α-GPC的得率。