[發明專利]測定生物樣品中的阿司匹林的方法、抗凝液及抗凝管

有效

• 申請號: 202010086397.6
• 申請日: 2020-02-11
• 公開（公告）號: CN111257453B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 唐吉軍;郭繼芬;王怡君;孟繁華;謝佩芝;馬廷輝
• 申請（專利權）人: 萬舒（北京）醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及測定生物樣品中的阿司匹林的方法。具體地說，一方面涉及一種抗凝液，其中包含氟化鈉、乙二胺四乙酸二鉀、草酸和水。本發明抗凝液用于處理包含阿司匹林的待檢測的生物樣品(例如全血，例如血清，例如血漿)。本發明還涉及一種用于生物樣品(例如全血，例如血清，例如血漿)抗凝的抗凝管，其包括管體以及密封于該管體內的抗凝液。本發明進一步涉及一種測定生物樣品中的阿司匹林含量的方法，該方法包括使所述抗凝液與包含阿司匹林的生物樣品混合，接著測定該生物樣品中的阿司匹林含量的步驟。本發明抗凝液呈現如說明書所述優異技術效果。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，涉及一種生物樣品尤其例如是血液樣品的檢測方法，尤其是涉及一種檢測血漿中的阿司匹林含量的方法，本發明特別是涉及一種在檢測血漿中阿司匹林含量時處置該血漿的方法，還涉及該方法中所使用的血漿抗凝管。

背景技術

作為一種百年老藥，目前阿司匹林(Aspirin，乙酰水楊酸)仍然作為臨床的一線用藥。在臨床上，需要經常對不同種類的阿司匹林制劑進行生物等效性評價，即需要測定服藥后血液/血漿中的藥物濃度。

自2010年起，歐洲藥品管理局(EMA)指南中要求阿司匹林藥品生物等效性研究中需同時檢測血漿中乙酰水楊酸和水楊酸的濃度。而乙酰水楊酸在血漿中極度不穩定，極易被水解成活性代謝產物水楊酸，其半衰期僅為10-20分鐘；同時血漿中乙酰水楊酸和水楊酸的濃度差異非常大，至少相差一個數量級，因此這對血漿樣品處理以及質譜分析檢測帶來很大挑戰，具體表現在：

1、如何維持待測物特別是乙酰水楊酸的穩定性，以保證檢測數據的真實、可靠

根據文獻調研，為了能有效阻止血漿樣本中乙酰水楊酸進一步水解，應使用能有效抑制酯酶活性的氟化鈉-草酸鉀抗凝液的真空采血管，并且所有抗凝管以及血漿凍存管都需要在冰水中預冷，血液采集后應置于立即置于冰水浴中，全血樣本應在采血后30分鐘內離心分離血漿，離心也應在4℃條件下進行，分離后的血漿樣本應立即放入-80℃冰箱或干冰中冷凍保存。

2、如何開發一套分析方法即可同時檢測兩種待測物，以實現血漿樣本的低成本、高效率的分析檢測

由于血漿中兩種待測物濃度相差懸殊，這對質譜分析方法開發帶有一定難度，文獻報道一些分析檢測機構采用兩套分析方法分別檢測兩種待測物，這不僅費時，更顯著增加分析檢測成本。

因此，本領域仍然期待有新的方法用于血漿樣品中乙酰水楊酸及其代謝物水楊酸的測定，尤其是能夠使生物樣品在進入色譜儀檢測前乙酰水楊酸的含量保持穩定，也就是說，該方法主要是涉及在進入色譜分析前的樣品處理過程中如何保持目標物質乙酰水楊酸在血漿生物樣品中的穩定性。

發明內容

本發明的目的在于提供一種測定生物樣品尤其是血漿中的阿司匹林即乙酰水楊酸及其代謝物水楊酸的方法，期待該種方法能夠使生物樣品在進入色譜儀檢測前乙酰水楊酸的含量保持穩定。本發明出人意料的發現，通過采用本發明的抗凝液和/或抗凝管，能夠使得所采集的生物樣品在進行色譜儀檢測前，即使供試樣品是在常溫條件下保存，仍然具有優良的穩定性，尤其是生物樣品中的乙酰水楊酸能夠保持穩定。本發明基于此發現而得以完成。

為此，本發明第一方面提供了一種抗凝液，其中包含氟化鈉、乙二胺四乙酸二鉀、草酸和水。

根據本發明第一方面的抗凝液，其中所述氟化鈉的濃度為20～100mg/mL，例如為30～80mg/mL，例如為40～60mg/mL，例如為50mg/mL。

根據本發明第一方面的抗凝液，其中所述乙二胺四乙酸二鉀的濃度為10～50mg/mL，例如為 20～40mg/mL，例如為25～35mg/mL，例如為30mg/mL。

根據本發明第一方面的抗凝液，其中所述草酸的濃度為50～200mg/mL，例如為60～150mg/mL，例如為80～120mg/mL，例如為100mg/mL。