[發明專利]一種高效提高微藻甘油三酯含量的代謝工程方法

在審

• 申請號: 202010085497.7
• 申請日: 2020-02-07
• 公開（公告）號: CN111206023A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: 劉進;張昱;丁巍
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/82;C12P7/64;C12R1/89
• 代理公司: 北京萬象新悅知識產權代理有限公司 11360
• 代理人: 李稚婷

1.一種提高微藻甘油三酯含量的方法，在微藻中表達具有下述(i)或(ii)所述氨基酸序列的甘油二酯酰基轉移酶：

(i)序列表中的SEQ ID No：1所示氨基酸序列；

(ii)序列表中的SEQ ID No：1所示氨基酸序列經過一至十個氨基酸殘基的取代、缺失或添加，且所衍生的蛋白質具有與(i)相同的功能。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，通過基因工程方法將所述甘油二酯酰基轉移酶的基因導入微藻中，并使該基因在微藻中表達。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述甘油二酯酰基轉移酶的基因是來源于三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)的DGAT1基因。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述DGAT1基因的核苷酸序列如序列表中SEQID NO：2所示。

5.如權利要求2所述的方法，其特征在于，將所述甘油二酯酰基轉移酶的基因構建在表達載體上，然后將所述載體導入微藻中，獲得甘油三酯含量提高的工程藻株。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述表達載體是微藻表達載體或植物表達載體，由組成型或誘導型啟動子驅動所述甘油二酯酰基轉移酶的基因在微藻中表達。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述組成型或誘導型啟動子選自下列啟動子中的一種：鹽藻黃素-葉綠色a/c結合蛋白啟動子、內源β-微管蛋白啟動子、β-肌動蛋白啟動子、核酮糖二磷酸羧化酶-加氧酶啟動子、硝酸還原酶啟動子。

8.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述微藻是三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum)。

9.一種生產甘油三酯的方法，利用權利要求1～8任一所述的方法獲得甘油三酯含量提高的微藻，培養繁殖該微藻并以其為原材料進行甘油三酯的提取和純化。