[發明專利]一種具有酰基轉移功能的酶及其應用

有效

• 申請號: 202010083819.4
• 申請日: 2020-02-10
• 公開（公告）號: CN111187760B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 李文利;肖菲;劉揚
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/08;C12P13/02;C12R1/19
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

本發明提供一種具有酰基轉移功能的酶及其應用，能夠對Macrolactins大環內酯類化合物和Chloramphenicol氯霉素進行酰基化修飾。本發明的酰基轉移酶，其氨基酸序列為SEQ ID NO:1。本發明的酰基轉移酶的應用，是將酰基供體的酰基結合到大環內酯類化合物和氯霉素上。本發明的具有酰基轉移功能的酶通過對Macrolactins酰基化反應能夠提高大環內酯類化合物的藥理活性，進而可能改善其生物利用率，增強藥效，降低毒副作用，為大環內酯類化合物的藥物研制提供一個新的策略。

技術領域

本發明屬于基因工程和生物制藥技術領域，具體涉及一種具有酰基轉移功能的酶及其應用。

背景技術

藥物經酰基化修飾通常能夠改變理化性質，提高生物療效。在藥物合成中，常采用酰化反應保護羥基，胺基；并且酰基可以通過氧化，還原，加成，重排等反應轉化為其它基團。因此，酰基轉移酶作為一種工具酶成為研究的熱點。

Macrolactins是一系列24元大環內酯類化合物，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗感染和抗衰老等生物學和藥理學活性。最早，Fenical研究組于1989年從一株深海細菌中分離得到了Macrolactins A-F，研究表明，Macrolactin A能夠抑制B1-F10鼠科動物的黑色素腫瘤細胞和哺乳動物單純皰疹病毒，并且能夠通過抑制HIV病毒的復制起到保護淋巴細胞的作用。這些年來，Macrolactins家族不斷壯大，科學家們相繼分離得到7-O-succinylMacrolactin F及7-O-succinyl Macrolactin A，Macrolactins G-M(其中H為22元大環內酯，L為雙環內酯)，Macrolactin N，7-O-malonyl Macrolactin A，Macrolactin O-R，Macrolactin S和Macrolactin T。這些Macrolactins都具有良好的抗菌活性，其中Macrolactin N-R能夠抑制金黃色葡萄球菌的肽脫甲酰酶，7-O-malonyl Macrolactin A對許多革蘭氏陽性病原菌，如耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌和耐萬古霉素的腸道球菌和洋蔥伯克霍爾德菌的變種都表現出較好的抑制作用，Macrolactin B和T不僅能夠抑制金黃色葡萄球菌，而且對植物病原真菌稻瘟霉和交鏈孢也有明顯效果。

作為一類極具應用潛力的藥物先導化合物，Macrolactins已經引起人們的極大關注，Macrolactins屬于聚酮類化合物，其骨架結構Macrolactin A是由聚酮合酶(Polyketide synthases，PKSs)催化組裝而成，然而其后修飾步驟的研究一直未見報導。發明人在研究Macrolactins的后修飾分子機制過程中，發現了對Macrolactins進行酰基化修飾的酶基因。通過對Macrolactins酰基化反應能夠提高大環內酯類化合物的藥理活性，進而可能改善其生物利用率，增強藥效，降低毒副作用，為大環內酯類化合物的藥物研制提供一個新的策略。

發明內容

本發明的目的是提供一種具有酰基轉移功能的酶及其應用，能夠對Macrolactins大環內酯類化合物進行酰基化修飾，從而彌補了現有技術的不足。

本發明一個方面提供一種酰基轉移酶，包括有：

a)序列為SEQ ID NO:1的蛋白酶；

b)通過對a)中的蛋白酶缺失、取代、插入或添加一個或幾個氨基酸，并具有a)酰基轉移酶活性的蛋白酶。

用于編碼上述酰基轉移酶的基因，其一種核苷酸序列為SEQ ID NO:2。

本發明另一個方面提供一種重組載體，該重組載體攜帶有用于表達本發明的酰基轉移酶的基因。

本發明還提供一種轉化子，是將用于表達本發明的酰基轉移酶的重組載體轉化宿主細胞獲的。

本發明的酰基轉移酶的應用，是將酰基供體的酰基結合到大環內酯類化合物上；