[發明專利]重組代謝微生物及其用途

在審

• 申請號: 202010082952.8
• 申請日: 2013-06-04
• 公開（公告）號: CN111218418A
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 陳銥婷;F·劉;M·科普克
• 申請（專利權）人: 朗澤科技新西蘭有限公司
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N1/15;C12P5/00;C12P9/00;C12R1/145;C12R1/01;C12R1/02;C12R1/645
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 孫占華;張廣育

1.一種重組微生物，其是通過將編碼異戊二烯合酶的核酸引入親本微生物而制備，所述親本微生物為自產乙醇梭菌(Clostridium autoethanogenum)、楊氏梭菌(Clostridiumljungdahlii)、拉氏梭菌(Clostridium ragsdalei)、食一氧化碳梭菌(Clostridiumcarboxidivorans)、德雷克氏梭菌(Clostridium drakei)、糞味梭菌(Clostridiumscatologenes)、醋酸梭菌(Clostridium aceticum)、蟻酸醋酸梭菌(Clostridiumformicoaceticum)、大梭菌(Clostridiummagnum)、食甲基丁酸桿菌(Butyribacteriummethylotrophicum)、伍氏醋酸桿菌(Acetobacterium woodii)、巴氏嗜堿菌(Alkalibaculum bacchii)、延長布勞特氏菌(Blautia producta)、粘液真桿菌(Eubacterium limosum)、熱醋穆爾氏菌(Moorella thermoacetica)、熱自養穆爾氏菌(Moorella thermautotrophica)、卵形鼠孢菌(Sporomusa ovata)、森林乙酸香蕉孢菌(Sporomusa silvacetica)、類球鼠孢菌(Sporomusa sphaeroides)、普氏產醋桿菌(Oxobacter pfennigii)或凱伍熱厭氧桿狀菌(Thermoanaerobacter kiuvi)，

其中所述重組微生物能夠由至少一種C1化合物生產異戊二烯，所述C1化合物選自一氧化碳和二氧化碳。

2.根據權利要求1所述的重組微生物，其中將編碼在甲羥戊酸途徑中發揮作用的外源酶的核酸進一步引入所述親本微生物中，其中所述重組微生物能夠通過甲羥戊酸途徑生產異戊烯基二磷酸；

任選地，其中所述編碼在甲羥戊酸途徑中發揮作用的外源酶的核酸選自甲羥戊酸激酶、二磷酸甲羥戊酸脫羧酶、磷酸甲羥戊酸激酶、硫解酶、3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A(HMG-CoA)還原酶和HMG-CoA合酶。

3.根據權利要求2所述的重組微生物，其中所述甲羥戊酸途徑為酵母的甲羥戊酸途徑，任選地其中所述酵母為酵母屬(Saccharomyces)。

4.根據前述權利要求中任一項所述的重組微生物，其具有一氧化碳脫氫酶。

5.根據前述權利要求中任一項所述的重組微生物，其中將編碼在DXS途徑中發揮作用的至少一種酶的核酸進一步進入所述親本微生物中，其中所述DXS途徑：

(a)并非天然存在于所述親本微生物中；或

(b)天然存在于所述親本微生物中；

任選地其中所述編碼在DXS途徑中發揮作用的至少一種酶的核酸選自：1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶DXS、1-脫氧-D-木酮糖5-磷酸還原異構酶DXR、2-C-甲基-D-赤藻糖醇4-磷酸胞苷酰基轉移酶IspD、4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藻糖醇激酶IspE、2-C-甲基-D-赤藻糖醇2,4-環二磷酸合酶IspF、4-羥基-3-甲基丁-2-烯-1-基二磷酸合酶IspG和4-羥基-3-甲基丁-2-烯基二磷酸還原酶。

6.根據前述權利要求中任一項所述的重組微生物，其中將編碼在Wood-Ljungdahl途徑中發揮作用的至少一種酶的核酸進一步進入所述親本微生物中，

任選地其中所述編碼在Wood-Ljungdahl途徑中發揮作用的至少一種酶的核酸選自：一氧化碳脫氫酶、甲酰基-四氫葉酸合成酶、亞甲基-四氫葉酸脫氫酶、甲酰基-四氫葉酸環化水解酶、亞甲基-四氫葉酸還原酶和一氧化碳脫氫酶/乙酰基-CoA合酶。

7.根據前述權利要求中任一項所述的重組微生物，其中所述異戊二烯合酶來源自植物。