[發明專利]一種定量檢測氟喹諾酮類藥物的量子點微球免疫層析試紙條

有效

• 申請號: 202010079138.0
• 申請日: 2020-02-03
• 公開（公告）號: CN111308067B
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發明（設計）人: 劉斐;劉婧;王彬;單衍可;王綬玙;陸雨楠
• 申請（專利權）人: 江蘇森信達生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/532;G01N33/53
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;李曉峰

本發明公開一種定量檢測氟喹諾酮類藥物的量子點微球免疫層析試紙條，該試紙條包括底板、樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊依次首尾銜接粘貼在底板上，結合墊上包被有量子點微球標記的氟喹諾酮單克隆抗體，硝酸纖維膜上設有包被氟喹諾酮?BSA復合物的檢測線和包被羊抗鼠IgG的質控線。利用該試紙條定量檢測氟喹諾酮類藥物，檢測靈敏度高，高出傳統試紙檢測2個數量級，檢測極限可達到0.05ppb；并且具有良好的線性范圍，為0.1ppb?100ppb；檢測特異性可達100％；批次批間差異小，具有良好的重復性；常溫可保存一年且靈敏度不降低，具有良好的穩定性；操作簡單，成本低廉，適合于現場快速定量檢測氟喹諾酮藥物。

技術領域

本發明屬于食品安全檢測技術領域，具體涉及一種定量檢測氟喹諾酮類藥物的量子點微球免疫層析試紙條。

背景技術

氟喹諾酮(Fluoroquinolones,FQs)是一類新型、高效、廣譜的人工合成抗菌藥物，被廣泛應用于獸藥和水產養殖業。由于FQs殘留可產生過敏反應、腸道菌群失調、致病菌耐藥性和潛在致癌性等威脅人類健康的問題，其在肉、牛奶、蜂蜜等動物源性食品中的殘留問題引起廣泛關注。為保障食品安全，中國、歐盟等規定了動物源性食品中的FQs最大允許殘留限量，對FQs類藥物的監測對保障食品安全具有重要意義。

目前，檢測FQs常見的方法包括高效液相色譜法(HPLC)、液相色譜-質譜/質譜法(LC-MS/MS)、酶聯免疫法(ELISA)等。盡管這些方法可以以高的靈敏度和準確性定量檢測FQs，但它們需要昂貴的設備，精通復雜操作的專業人員，并且消耗時間長，從而限制了它們在現場快速檢測中的應用。膠體金免疫層析法具有檢測快速、成本低、操作方便等優點，因此廣泛用于檢測FQs類藥物，但仍存在一些缺陷，如無法定量檢測、檢測靈敏度低、基質效應明顯背景干擾大等。設計一種定量檢測氟喹諾酮類藥物的檢測裝置或方法是本領域亟待解決的技術問題。

本發明設計的量子點微球免疫層析試紙條是以量子點微球作為標記物建立的一種免疫層析方法。量子點激發光譜寬而發射波長窄，熒光效率高，生物兼容性好，量子點微球是一種通過高聚物載體上吸附或包埋量子點而形成的一種標記物，單體量子點微球包裹有數百或者數千的量子點顆粒，因此相較于量子點，具有更高的發光強度，可有效提高檢測靈敏度和穩定性。結合手持式熒光檢測儀，可實現現場快速定量檢測，具有良好的市場前景。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術存在的問題，提供一種檢測靈敏度高，穩定性好，可現場定量檢測氟喹諾酮類藥物的量子點微球試紙條及其制備方法和檢測方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案實現：

一種定量檢測氟喹諾酮類藥物的量子點微球免疫層析試紙條，該試紙條包括底板、樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述的樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊依次首尾銜接粘貼在底板上，所述的結合墊上包被有氟喹諾酮單克隆抗體-標記物，所述的硝酸纖維素膜上設有包被氟喹諾酮-蛋白復合物的檢測線和包被羊抗鼠IgG的質控線。

作為一種優選技術方案：所述底板的材料為PVC或硬質不吸水的材料；所述樣品墊的材料為玻璃纖維、棉纖維、濾紙纖維或聚脂纖維；所述結合墊的材料為玻璃纖維或聚酯纖維；所述吸水墊的材料為吸水濾紙。

作為一種優選技術方案：所述的樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊依次以2-4mm的間距交互層疊首尾粘貼在底板上。

作為一種優選技術方案：所述的標記物為量子點微球、時間分辨熒光微球或者上轉換熒光微球；進一步優選的所述量子點微球的粒徑范圍為50-200nm。

作為一種優選技術方案：所述的檢測線上氟喹諾酮-蛋白復合物的用量為0.3-0.8μg/cm；所述的質控線上羊抗鼠IgG的用量為0.5-1.5μg/cm；稀釋液為含3％-5％蔗糖的PBS緩沖液。