[發(fā)明專利]小麥單倍體誘導基因及其應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010074738.8 | 申請日： | 2020-01-22 |
| 公開（公告）號： | CN111073875B | 公開（公告）日： | 2022-01-25 |
| 發(fā)明（設計）人： | 陳紹江;劉晨旭;鐘裕;祁曉龍;劉宗凱 | 申請（專利權）人： | 中國農(nóng)業(yè)大學 |
| 主分類號： | C12N9/16 | 分類號： | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/82;A01H5/00;A01H5/10;A01H6/46;A01H1/02 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢 |
| 地址： | 100193 北京市海*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 小麥 單倍體 誘導 基因 及其 應用 | ||
1.一種小麥母本單倍體誘導系的制備方法，包括如下步驟：沉默或抑制目的小麥基因組中PLA基因的表達和/或活性或敲除PLA基因，得到轉(zhuǎn)基因小麥，即為小麥母本單倍體誘導系；
所述PLA基因為小麥A基因組中的PLA-A基因和小麥D基因組中的PLA-D基因；
或，所述PLA基因為小麥A基因組中的PLA-A基因和小麥B基因組中的PLA-B基因和小麥D基因組中的PLA-D基因；
所述PLA-A基因、所述PLA-B基因和所述PLA-D基因的基因組序列分別如序列表中序列1、序列4和序列7所示。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于：所述沉默或抑制目的小麥基因組中PLA基因的表達和/或活性或敲除PLA基因為突變目的小麥基因組中PLA基因使目的小麥基因組中PLA基因表達量降低或使目的小麥基因組中PLA基因發(fā)生缺失突變或插入突變或堿基替換。
3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于：所述使目的小麥基因組中PLA基因發(fā)生缺失突變或插入突變或堿基替換的方式為CRISPR/Cas9。
4.根據(jù)權利要求3所述的方法，其特征在于：所述CRISPR/Cas9的靶序列為序列1第905-923位和序列7第939-957位；
或，所述CRISPR/Cas9的靶序列為序列1第699-718位。
5.一種小麥母本單倍體的制備方法，包括如下步驟：將由權利要求1-4任一所述的方法制備的小麥母本單倍體誘導系或其后代進行自交或者作為父本與其他小麥材料雜交，得到自交后代或雜交后代，即為所述小麥母本單倍體。
6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法還包括如下步驟：將所述自交后代或所述雜交后代單株進行單倍體性狀鑒定和/或葉片倍性鑒定和/或分子鑒定，選取至少一種方法鑒定為單倍體的后代單株為小麥母本單倍體。
7.如下1)-3)任一種應用：
1)由權利要求1-4任一所述的方法制備的小麥母本單倍體誘導系在制備小麥母本單倍體中的應用；
2)沉默或抑制目的小麥基因組中PLA基因的表達和/或活性或敲除PLA基因的物質(zhì)在制備小麥母本單倍體誘導系或小麥母本單倍體中的應用；
3)由權利要求1-4任一所述的方法制備的小麥母本單倍體誘導系或由權利要求5或6所述的方法制備的小麥母本單倍體在小麥雜交種選育或小麥單倍體育種中的應用。
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