[發明專利]小柴胡湯對褪黑素受體1、褪黑素受體2靶標的作用

在審

• 申請號: 202010074157.4
• 申請日: 2020-01-22
• 公開（公告）號: CN113144151A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 李洪梅;孫建輝;陳紅映
• 申請（專利權）人: 中國中醫科學院中藥研究所
• 主分類號: A61K36/9068
• 分類號: A61K36/9068;A61P25/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本申請涉及小柴胡湯對褪黑素受體1、褪黑素受體2靶標的作用的研究，具體涉及小柴胡湯對褪黑素受體1、褪黑素受體2具有上調作用，以及小柴胡湯制備成中藥現代化研究中增強褪黑素受體1、褪黑素受體2表達的陽性對照藥。

本申請為了克服發明專利的單一性問題，將小柴胡湯治療失眠的兩類靶標分別申請專利。本申請涉及小柴胡湯對褪黑素受體1、褪黑素受體2靶標的作用。

技術領域：本申請涉及中藥復方現代化研究，具體涉及中藥復方小柴胡湯作用靶標的研究。

背景技術：

失眠，屬于中醫學中“不寐”“目不瞑”等范疇，在現代醫學中指頻繁且持續的入睡困難和(或)睡眠維持困難并導致睡眠感不滿意的睡眠障礙，其嚴重影響失眠患者的生活和工作效率，并給個人、家庭及社會帶來嚴重的負擔。失眠病因較多，凡可致陰陽不交，心神受擾，魂無所藏者，皆可導致失眠的發生，但其主要有飲食不節、情志失常、勞逸失調、病后體虛等。

中醫藥是中國傳統醫學，小柴胡湯是張仲景《傷寒論》的經典代表方劑，由柴胡、黃芩、人參、半夏、炙甘草、生姜、大棗等7味藥組成。小柴胡湯是少陽病的主方，主要功效為和解少陽，和胃降逆，扶正祛邪。此方在千百年的流傳中，被廣泛地應用于臨床各科，均有卓越療效。小柴胡湯對肝郁化火型失眠癥、慢性失眠癥、失眠陰虛肝郁痰擾癥、肝郁氣滯型失眠癥和圍絕經期失眠具有一定的治療效果。小柴胡湯臨床用于治療失眠效果顯著，但目前沒有其治療失眠分子機制的研究，也沒有對小柴胡中的物質基礎進行研究。

發明內容：

本申請通過研究，發現了小柴胡湯治療失眠的靶點，以及作用于靶點的藥效物質基礎。具體而言，本申請發明內容如下：

(1)小柴胡湯在制備治療失眠的藥物中的應用；

(2)小柴胡湯在制備增強褪黑素受體1、褪黑素受體2受體表達的應用

(3)小柴胡湯在制備褪黑素受體1、褪黑素受體2試劑中的應用；

(4)小柴胡湯在制備褪黑素受體1、褪黑素受體2陽性對照藥中應用；

其中，小柴胡湯柴胡、黃芩、人參、半夏、炙甘草、生姜、大棗7味藥組成。

小柴胡湯的用量為柴胡30g，黃芩9g、人參9g、半夏9g、炙甘草9g、生姜9g，大棗4枚。

小柴胡湯的制備方法為，取柴胡30g，黃芩9g、人參9g、半夏9g、炙甘草9g、生姜9g，大棗4枚備用；加入上述藥味重量3倍量的水，煎煮2次，每次1-2小時；合并濾液，濃縮至稠膏。

具體實施方式：

實施例1：小柴胡湯的制備

取柴胡30g，黃芩9g、人參9g、半夏9g、炙甘草9g、生姜9g，大棗4枚備用；加入上述藥味重量3倍量的水，煎煮2次，每次1-2小時；合并濾液，濃縮至稠膏。

實施例2-效果實驗：

取健康大鼠50只，體重200±20g，適宜24h，隨機分為空白對照組、模型對照組、小柴胡湯高劑量組(13.9g/kg)、小柴胡湯中劑量組(6.9g/kg)、小柴胡湯低劑量組(3.5g/kg)，每組10只。除空白對照組外各組大鼠腹腔注射對氯苯丙氨酸(PCPA劑量，350mg/kg)，每日1次，連續2日，建立失眠大鼠模型。從第3日給藥，其中空白組和模型組給予純凈水，藥物組分別給小柴胡湯高劑量、中劑量、小劑量，連續給藥10天。實驗動物末次給藥后，大鼠取腦第3腦室頂、丘腦上方的松果體，固定，脫水，透明，包埋；制作石蠟切片；采用免疫組化方法染色鏡檢，并進行統計分析。

具體實驗結果如下：

表1小柴胡湯對褪黑素受體1、褪黑素受體2靶標的作用

注：與模型對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01

通過鏡檢以及檢測可知，造模后，模型組褪黑素受體1、褪黑素受體2與空白組比較均降低，表明造模成功，各給藥組的褪黑素受體1、褪黑素受體2表達均高于模型組，且呈現劑量正相關，且具有顯著性差異。表明小柴胡湯對褪黑素受體1、褪黑素受體2靶標具有正調節作用。