[發(fā)明專利]一種水溶性功能紅曲粉的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010073448.1
• 申請日: 2020-01-22
• 公開（公告）號: CN111139268B
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高益槐;戴金玉;吳學明;李小娟;黃圖成
• 申請（專利權(quán)）人: 安諾康（福建）生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 饒文君;蔡學俊

1.一種水溶性功能紅曲粉的制備方法，其特征在于，具體包括：

第一階段固態(tài)發(fā)酵，包括以下具體步驟：

（1）菌種活化：紅曲菌純種接入平板培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)5～10天活化菌種；

（2）一級種子液的制備：往活化好的菌種平板培養(yǎng)基中加入20毫升無菌生理鹽水，用接種環(huán)來回剮蹭菌絲體洗刷孢子及菌絲制成平板種子液，按2%的接種量接種至種子培養(yǎng)基中，30℃，100rpm，培養(yǎng)48小時；

（3）二級種子液的制備：無菌條件下將一級種子液按10%的接種量接種至種子培養(yǎng)基中，30℃，100rpm，培養(yǎng)24小時；

（4）固態(tài)發(fā)酵：無菌條件下按重量比為8%～20%，將二級種子液接種至固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基質(zhì)中，攪拌均勻后按每袋裝料350g～380g分裝至食用菌栽培袋中，袋口用塞有透氣棉的蓋子旋緊；將栽培袋移入10萬潔凈度的高溫房，培養(yǎng)溫度30℃，濕度80-90%，每天打散，待物料表面開始變紅后，轉(zhuǎn)入10萬潔凈度的低溫房，培養(yǎng)溫度25℃，濕度40～60%，每三天打散一次，培養(yǎng)30天出料，將發(fā)酵好的物料轉(zhuǎn)入烘干間，烘干溫度55℃，待物料水分低于10%，粉碎物料，粉碎好的物料取樣檢測洛伐他汀含量，做好標記入庫保存或直接用于提取；

第二階段發(fā)酵產(chǎn)物的分離提取及制粉，包括以下具體步驟：

1）水浸提：將第一階段制備的烘干粉碎后的紅曲粉物料與純化水按重量比為1:20～60的比例混合，55℃浸泡1～5小時，每隔15分鐘攪拌一次，制得紅曲粉水溶液；

2）板框壓濾：將步驟1）的紅曲粉水溶液通過高效高密度固液分離1mm工業(yè)濾布過濾，去除不溶物，收集清液；

3）超濾：將步驟2）所得清液進行膜過濾，收集濾液；所述膜為攔截率0.22微米-5000分子質(zhì)量的有機膜；

4）納濾：將步驟3）所得的濾液進行膜過濾，收集濃縮液，所述膜為攔截率1～2納米-250分子質(zhì)量的有機膜；

5）凍干：將步驟4）所得濃縮液按質(zhì)量體積比為3～7%加入麥芽糊精溶解均勻后進行凍干，即得水溶性功能紅曲粉；

6）凍干粉粉碎、檢測、包裝、成品出廠；

所述紅曲菌在中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心的菌種保藏編號為41649；

第一階段固態(tài)發(fā)酵中，所述平板培養(yǎng)基的制備為：50g馬鈴薯切成小塊煮沸30分鐘，兩層紗布過濾，濾液加入5g葡萄糖，5g瓊脂繼續(xù)煮沸10分鐘，冷卻至室溫后用純化水定至250毫升，121℃，30分鐘滅菌后分裝至8塊無菌平皿待用；

第一階段固態(tài)發(fā)酵中，所述種子培養(yǎng)基的制備為：葡萄糖3～8%?,黃豆粉3～5%，硫酸鎂0.1～0.3%，蛋白胨1～3%，甘油3～8%，磷酸二氫鉀0.1～0.5%，硫酸鈣0.1～0.3%，余量為水，pH用醋酸調(diào)制3.0～5.0，分裝至1000毫升三角瓶內(nèi)，裝液量250毫升，121℃，30分鐘滅菌后冷卻待用；

第一階段固態(tài)發(fā)酵中，所述固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基質(zhì)的制備：秈米粉50～80%，黃豆粉10～30%，麩皮粉5～20%，按每噸固體基質(zhì)添加重量百分比25～40%的營養(yǎng)液混合均勻；將混合好的培養(yǎng)基質(zhì)放入脈動真空滅菌器內(nèi)，待設(shè)備溫度顯示125℃后開始計時，滅菌30～60分鐘，滅菌結(jié)束完后冷卻至室溫，水分含量35～40%，用粉碎機對培養(yǎng)基質(zhì)再次粉碎，物料松散無結(jié)塊；所述秈米粉、黃豆粉、麩皮粉用粉碎機分別粉碎至50～100目待用；所述營養(yǎng)液的制備：蛋白胨2～5%，葡萄糖1～5%，酵母菌膏1～3%，玉米漿干粉0.5～2%，硫酸鈣0.1%，余量為水，用醋酸調(diào)pH5.0，待用。