[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于單細(xì)胞和單微球共捕獲的裝置及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010071235.5
• 申請(qǐng)日: 2020-01-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111254046B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-09-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 董芝;方群
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12M1/00
• 分類(lèi)號(hào): C12M1/00
• 代理公司: 杭州天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

1.一種用于單細(xì)胞和單微球共捕獲的裝置，其特征在于，包括上部的樣品腔、下部的液體腔以及安裝在兩者之間的微孔膜，所述的微孔膜上設(shè)有至少一組微孔，每組微孔包含一大一小兩個(gè)相互連接或相互靠近的微孔；其中，尺寸較大的微孔用于捕獲單細(xì)胞和單微球中較大的微粒，尺寸較小的微孔用于捕獲單細(xì)胞和單微球中較小的微粒；微孔尺寸小于其所要捕獲的微粒的尺寸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于單細(xì)胞和單微球共捕獲的裝置，其特征在于，每組微孔包含一大一小兩個(gè)相互連接的微孔，較大的微孔為圓形，較小的微孔為三角形、梯形、橢圓形或多邊形；每組微孔內(nèi)大微孔與小微孔的中心間距小于待捕獲的尺寸較大的微粒的直徑。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于單細(xì)胞和單微球共捕獲的裝置，其特征在于，每組微孔包含一大一小兩個(gè)相互靠近的微孔，且兩個(gè)微孔之間的中心間距小于待捕獲的尺寸較大的微粒的直徑；兩個(gè)微孔分別為圓形、橢圓形、三角形或多邊形。

4.一種單細(xì)胞和單微球共捕獲方法，其特征在于，采用權(quán)利要求1～3任一所述的用于單細(xì)胞和單微球共捕獲的裝置，包括以下步驟：

(1)根據(jù)待捕獲的細(xì)胞和微球的尺寸，選擇對(duì)應(yīng)的微孔膜安裝在樣品腔和液體腔之間，同時(shí)確定捕獲的順序；

(2)在樣品腔或液體腔或兩腔中加入液體，使微孔膜處于液體環(huán)境；

(3)打開(kāi)驅(qū)動(dòng)源，為微孔膜的一側(cè)或者兩側(cè)提供驅(qū)動(dòng)力；

(4)在樣品腔中加入微球樣品和細(xì)胞樣品中尺寸較大的樣品，在驅(qū)動(dòng)力的作下，利用微孔膜上的尺寸較大的微孔對(duì)該樣品進(jìn)行捕獲；

(5)去除樣品腔內(nèi)多余的微球或細(xì)胞；

(6)在樣品腔中加入微球樣品和細(xì)胞樣品中尺寸較小的樣品，在驅(qū)動(dòng)力的作下，利用微孔膜上的尺寸較小的微孔對(duì)該樣品進(jìn)行捕獲；

(7)去除樣品腔內(nèi)多余的細(xì)胞或微球，關(guān)閉驅(qū)動(dòng)源，完成共捕獲。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的單細(xì)胞和單微球共捕獲方法，其特征在于，步驟(1)中，在樣品腔上方設(shè)置顯微鏡，并用照相機(jī)將顯微鏡捕捉到的圖像實(shí)時(shí)地反映到計(jì)算機(jī)屏幕上。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的單細(xì)胞和單微球共捕獲方法，其特征在于，步驟(3)中，所述的驅(qū)動(dòng)力包括流體壓力、電場(chǎng)力、磁力、介電力、離心力和聲波。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的單細(xì)胞和單微球共捕獲方法，其特征在于，步驟(5)的具體步驟為：用移液槍或其他工具對(duì)微孔膜表面進(jìn)行吹打或攪動(dòng)，處于尺寸較小微孔處的樣品因受捕獲驅(qū)動(dòng)力小而被吹打起來(lái)，回到懸浮狀態(tài)；再用移液槍吸走樣品腔中的液體，為樣品腔換液，從而除去多余的微球或細(xì)胞樣品。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的單細(xì)胞和單微球共捕獲方法，其特征在于，步驟(7)中，在完成單細(xì)胞和單微球的共捕獲后，在微孔膜上原位生成液滴，所述液滴包裹了同一組微孔上的單細(xì)胞和單微球，不同的液滴之間以油相、氣相或其他不互溶相所隔離。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的單細(xì)胞和單微球共捕獲方法，其特征在于，步驟(7)中，在完成單細(xì)胞和單微球的共捕獲后，將同一組微孔上的單細(xì)胞和單微球轉(zhuǎn)移至其他的獨(dú)立環(huán)境，使不同的單細(xì)胞-單微球之間存在隔離屏障，以避免不同單細(xì)胞-單微球之間的交叉污染。