[發(fā)明專利]一種靶向熱休克蛋白60的親和多肽及其篩選方法與用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010068337.1
• 申請日: 2020-01-20
• 公開（公告）號: CN111269288B
• 公開（公告）日: 2022-02-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬赫遙;魏敏杰;徐嬌;范悅;姜凱
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K19/00;C12N15/11;A61K47/64;A61K45/00;A61P35/00;A61K51/08
• 代理公司: 沈陽亞泰專利商標(biāo)代理有限公司 21107
• 代理人: 史力伏

本發(fā)明涉及一種靶向熱休克蛋白60的親和多肽及其篩選方法與用途，所述多肽如以下通式所示：CX₁X₂X₃X₄SX₅X₆C。其可以特異性靶向HSP60，尤其是基于HSP60在大多數(shù)腫瘤中高表達(dá)的特點(diǎn)，進(jìn)而為高效靶向識別腫瘤組織，預(yù)測和提高腫瘤靶向治療提供新的可能性；本發(fā)明提供了一種有效篩選HSP60靶向結(jié)合多肽的方法，特點(diǎn)為選高通量，效率高，篩選出的親和多肽，分子量小、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好；本發(fā)明還涉及了該多肽作為多肽分子探針、多肽制劑、腫瘤導(dǎo)向多肽或顯影劑的藥物組合及其用途。本發(fā)明所述多肽能對HSP60具有特異性靶向作用，對腫瘤細(xì)胞選擇性強(qiáng)，應(yīng)用廣泛且安全可靠，生產(chǎn)成本低。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種靶向熱休克蛋白60的親和多肽(HSP60)及其篩選方法與用途，其具有良好的親和性、敏感性及對腫瘤細(xì)胞特異靶向性，可制備藥物或顯影劑，應(yīng)用于腫瘤的診斷、預(yù)防及治療。

背景技術(shù)

惡性腫瘤是全球公認(rèn)的公共健康問題，其發(fā)病率和致死率呈逐年上升趨勢。根據(jù)國際癌癥研究中心估計(jì)，未來全球癌癥發(fā)病人數(shù)將以年均3％-5％的速度增長，預(yù)計(jì)到2020年全球?qū)⒂?000萬新發(fā)癌癥病例，死亡病例將達(dá)到1200萬。我國癌癥呈現(xiàn)明顯的高發(fā)態(tài)勢，且癌癥年輕化趨勢愈發(fā)明顯，這嚴(yán)重影響著人們的生活質(zhì)量和水平。隨著分子機(jī)制的不斷發(fā)展和豐富，人類發(fā)現(xiàn)癌癥和基因密切相關(guān)。在分子水平上，靶向作用于突變的癌基因，能精準(zhǔn)殺傷癌細(xì)胞，于是腫瘤的個體化治療與靶向治療應(yīng)運(yùn)而生。雖然放化療和靶向治療都是全身治療，但是傳統(tǒng)的抗腫瘤化療藥物靶向性差，選擇性低，有較大的毒性和不良反應(yīng)，對正常細(xì)胞有一定程度的損傷。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的不斷研究發(fā)展和科學(xué)技術(shù)日新月異的變化，癌癥治療已經(jīng)從傳統(tǒng)療法轉(zhuǎn)向分子靶向治療，治療的特異性、安全性及有效性將極大的提高，而毒副反應(yīng)則相對于傳統(tǒng)藥物較低。

靶向治療是通過定向阻斷癌細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)導(dǎo)信號，破壞了癌細(xì)胞的代謝，阻止腫瘤血管生成，切斷營養(yǎng)物質(zhì)的供給，從而抑制癌細(xì)胞的生長。靶向藥物通過特異性作用于靶點(diǎn)，減少或消除了對正常細(xì)胞的殺傷作用，治療效果得到大幅度提高。對于不能耐受化療或不愿意接受化療的患者，靶向治療是首選的方法。靶向給藥系統(tǒng)可將藥物選擇性富集于靶器官，靶組織或靶細(xì)胞中。由于抗體藥物分子量大，較難滲入到實(shí)體瘤組織中且易產(chǎn)生耐藥性等問題，因此限制了抗體類藥物的臨床應(yīng)用。而多肽類藥物以其分子量小、靶向性高、成藥性強(qiáng)、活性好、低免疫原性和毒性、易于裝載等優(yōu)勢在抗腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究及臨床應(yīng)用中得到了廣泛關(guān)注；且多肽在體內(nèi)不易蓄積，與其他藥物的相互作用少，與體內(nèi)受體的親和力好。環(huán)七肽由于有二硫鍵的存在，構(gòu)象更加穩(wěn)定,在體內(nèi)不易被降解，可以應(yīng)用于腫瘤靶向肽的篩選。

熱休克蛋白60(HSP60)是線粒體中主要的ATP依賴性伴侶蛋白，屬于熱休克蛋白家族成員，廣泛存在于細(xì)菌和哺乳動物中，是細(xì)胞在應(yīng)激條件(如熱刺激，高溫，高壓，低氧)下合成的一類蛋白質(zhì)。HSP60是由低聚物形成的雙環(huán)結(jié)構(gòu)，每一個亞基包含3個結(jié)構(gòu)域：頂端域、赤道域、中間域。每七個亞基構(gòu)成一個環(huán)狀，雙環(huán)結(jié)構(gòu)的中央形成了一個巨大的腔隙，將未折疊的蛋白質(zhì)通過疏水作用綁定。其主要功能有參與熱激反應(yīng)；幫助多肽折疊；促進(jìn)細(xì)胞凋亡，也可促進(jìn)細(xì)胞的存活等。近些年來研究發(fā)現(xiàn)HSP60在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、前列腺癌、大腸癌，胰腺癌，卵巢癌等多種癌癥中表達(dá)異常，因此開發(fā)靶向作用于HSP60的腫瘤靶向肽具有十分重要的意義，為開發(fā)新型腫瘤靶向治療提供了新的依據(jù)。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種靶向熱休克蛋白60的親和多肽，其特點(diǎn)在于特異性親和細(xì)胞表面的熱休克蛋白60(HSP60)，從而選擇性地結(jié)合腫瘤細(xì)胞，特別是這種多肽的篩選方法及上述多肽或其衍生產(chǎn)品在制備靶向HSP60抗腫瘤藥物或顯像制劑中的用途。

本發(fā)明采用以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)發(fā)明目的：