[發明專利]一種大麻色烯的提取分離方法

在審

• 申請號: 202010064213.6
• 申請日: 2020-01-20
• 公開（公告）號: CN111138400A
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: 王鉦霖;劉勝貴;蔣永昌;付彬彬;李智高;孔令羽
• 申請（專利權）人: 云南綠新生物藥業有限公司
• 主分類號: C07D311/58
• 分類號: C07D311/58
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種大麻色烯的提取分離方法，其特征在于，步驟如下：

（1）以大麻的花葉部位為原料，粉碎制成30-50目顆粒后采用質量濃度60-80%的乙醇溶液熱回流提取2-3次，每次回流提取1-3小時，合并提取液，減壓濃縮回收乙醇，得乙醇提取濃縮液；

（2）待步驟（1）乙醇提取濃縮液冷卻至常溫后，加入一定量的正己烷萃取，將大麻色烯萃取到有機溶劑相層中，收集合并有機溶劑相層，回收有機溶劑，得大麻色烯萃取濃縮液；

（3）在步驟（2）的大麻色烯萃取濃縮液中加入一定量的活性炭，升溫攪拌，靜置2分鐘后用玻砂漏斗過濾，濾液濃縮抽干，得到大麻色烯粗膏；

（4）在步驟（3）的大麻色烯粗膏中加入質量濃度10%的乙醇，加熱攪拌形成混懸液，靜置冷卻后取上清液過聚酰胺樹脂柱，上樣完后用純凈水洗脫雜質至流出液為無色，然后用質量濃度10-20%乙醇溶液洗聚酰胺樹脂柱至流出液為無色，再用質量濃度25-30%的乙醇溶液洗脫至無雜質，最后用質量濃度40-50%的乙醇溶液洗脫收集大麻色烯，分瓶收集，薄層鑒別后合并含有大麻色烯目標物的洗脫液，減壓濃縮回收乙醇，得聚酰胺層析大麻色烯粗品；

（5）將步驟（4）聚酰胺層析大麻色烯濃縮物用中性氧化鋁干法拌樣，上中性氧化鋁柱，干法上樣后，用氯仿-正己烷溶液洗脫除雜，然后用氯仿-乙酸乙酯-乙醇胺液洗脫大麻色烯，收集含大麻色烯目標物洗脫液，濃縮得大麻色烯半成品，含量大于6%；

（6）將步驟（5）大麻色烯粗品用甲醇溶解，過氨基鍵合硅膠柱、氰基鍵合硅膠柱或苯基鍵合硅膠柱，加壓柱層析；鍵合硅膠柱用質量濃度20%的甲醇溶液平衡后，使用質量濃度30%-35%的甲醇溶液洗2-3個柱體積，然后用質量濃度42-50%的甲醇溶液洗脫，最后用質量濃度85-92%的甲醇溶液洗脫，薄層層析鑒別，洗脫至無大麻色烯斑點為止，對濃度42-50%的甲醇洗脫液進行薄層層析鑒別，合并含有大麻色烯的洗脫液，濃縮得大麻色烯半成品；

（7）將步驟（6）中濃縮物用層析溶劑溶解，過聚酰胺類填料制備色譜柱，收集大麻色烯段洗脫液，濃縮回收溶劑，即得到單體大麻色烯溶液；

（8）步驟（7）中得到的濃縮液冷凍結晶，過濾；得到的晶體再用二次重蒸丙酮水溶解結晶，抽濾，晶體低溫干燥得到大麻色烯成品。

2.根據權利要求1所述的大麻色烯的提取分離方法，其特征在于，所述步驟（1）中回流提取第一次提取添加原料質量7-9倍的乙醇溶液，其余提取添加原料質量4-5倍的乙醇溶液，濃縮溫度75-80℃,真空度0.06-0.078MPa,濃縮至1/10體積。

3.根據權利要求1所述的大麻色烯的提取分離方法，其特征在于，所述步驟（2）加入正己烷萃取，正己烷加入量為乙醇提取濃縮液的2-3倍，萃取次數為2-3次，合并萃取液濃縮至乙醇提取濃縮液體積的1/5。

4.根據權利要求1所述的大麻色烯的提取分離方法，其特征在于，所述步驟（3）加入活性炭的量為大麻色烯萃取濃縮液的2-8%，升溫至40-50℃，攪拌15-20min。

5.根據權利要求1所述的大麻色烯的提取分離方法，其特征在于，所述步驟（5）用正己烷-氯仿是正己烷、氯仿按體積比15:1溶液洗脫除雜；然后用氯仿-乙酸乙酯-乙醇胺溶液洗脫大麻色烯，是氯仿、乙酸乙酯和乙醇胺按體積比12:1:0.5的比例混合制得。

6.根據權利要求1所述的大麻色烯的提取分離方法，其特征在于，所述步驟（8）中濃縮液冷凍結晶，冷凍溫度為-15 — -10℃，結晶時長18-24h；；二次重蒸丙酮水的配比為4：1（丙酮：水）。