[發明專利]唾液或口腔拭子的保存液及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010063435.6
• 申請日: 2020-01-20
• 公開（公告）號: CN111183973A
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 梁玉姣;耿彪;曹健榮
• 申請（專利權）人: 德諾杰億（北京）生物科技有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02;C12N15/10
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 徐樂

本發明涉及生物技術領域，具體而言，提供了一種唾液或口腔拭子的保存液及其制備方法和應用。本發明提供的保存液，包括：Tris?HCl 10?50mmol/L，尿素0.2?1mol/L，SDS 0.3?1w/v％，EDTA?Na2 1?8mmol/L，褐藻酸鈉2?8w/v％和左旋肉堿3?8w/v％，pH為7?10。在本發明中，保存液各組分通過有效的配比與之間的協同作用，使得唾液或口腔拭子樣本可以長時間保存，特別是在35℃以上的高溫環境中，也可以實現樣本的良好保存。該保存液使得唾液或口腔拭子提取基因組DNA的應用更為廣泛，降低了環境和操作要求，從而降低了操作成本，同時有利于后續的PCR試驗操作。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體而言，涉及一種唾液或口腔拭子的保存液及其制備方法和應用。

背景技術

人體組織及體液中提取得到的基因組DNA樣本在基因工程和分子生物學研究等領域應用廣泛。通常用于PCR反應和其他測試的基因組DNA主要從抗凝血中提取，然而抗凝血保存時間長后，會形成血塊，給提取帶來了不便。而且通過采血提取DNA還需專業的人員進行抽血、有些人對抽血有抵觸的心理，該方式具有無法大量隨時采集樣本的缺點。

唾液及口腔基因組DNA提取相對于抗凝血采集基因組DNA的方式來說，是一種無傷害、無痛苦、操作簡單獲得基因組DNA的方法，由于其室溫條件下保存時間較長時仍可獲得完整的基因組DNA，近年來逐漸被采用。

人體內唾液中99％是水，含鈉、鉀、鈣、鎂、氯、碳酸氫根、磷酸根等電解質，粘多糖、糖蛋白、淀粉酶、舌酯酶、抗菌酶、富脯氨酸蛋白等有機物，同時含有多種細菌和口腔脫落細胞。眾所周知，DNA在高溫環境中容易發生降解，而現有技術中并沒有對高溫環境保DNA提供一個有效的保存試劑。因此如何在高溫環境下長時間保證基因組DNA的完整成為唾液、口腔拭子保存液的關鍵所在。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種唾液或口腔拭子的保存液，該保存液緩解了現有技術中保存液不能在高溫環境中長時間保存唾液或口腔拭子，從而保證基因組DNA不降解的技術問題。

本發明的第二目的在于提供一種唾液或口腔拭子的保存液的制備方法，該方法簡單易操作，成本低。

本發明的第三目的在于提供上述保存液在唾液或口腔拭子提取基因組DNA中的應用。

本發明的第四目的在于提供上述保存液在保存唾液或口腔拭子中的應用。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種唾液或口腔拭子的保存液，包括：Tris-HCl 10-50mmol/L，尿素0.2-1mol/L，SDS 0.3-1w/v％，EDTA-Na2 1-8mmol/L，褐藻酸鈉2-8w/v％和左旋肉堿3-8w/v％，保存液pH為7-10。

進一步地，包括：Tris-HCl 15-45mmol/L，尿素0.3-0.9mol/L，SDS0.3-0.8w/v％，EDTA-Na2 1-6mmol/L，褐藻酸鈉3-7w/v％和左旋肉堿3-7w/v％，保存液pH為7-9。

進一步地，包括：Tris-HCl 20-40mmol/L，尿素0.3-0.7mol/L，SDS0.4-0.7w/v％，EDTA-Na2 2-5mmol/L，褐藻酸鈉4-6w/v％和左旋肉堿3-5w/v％，保存液pH為7-8。

進一步地，包括：Tris-HCl 30mmol/L，尿素0.6mol/L，SDS 0.5w/v％，EDTA-Na23mmol/L，褐藻酸鈉5w/v％和左旋肉堿4w/v％，保存液pH為7.5。

上述保存液的制備方法，按配比將Tris-HCl，尿素，SDS，EDTA-Na2，褐藻酸鈉和左旋肉堿用水混勻，調整pH，得到保存液。