[發(fā)明專利]一種以葉柄為外植體的河北楊組培快繁方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010058429.1
• 申請日: 2020-01-19
• 公開（公告）號: CN111557239A
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 白玉娥;代金玲;燕興;烏日罕
• 申請（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海申蒙商標(biāo)專利代理有限公司 31214
• 代理人: 周宇凡

本發(fā)明屬于林業(yè)無性繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種以葉柄為外植體的河北楊組培快繁方法，所述方法包括如下步驟：（1）以河北楊葉柄為外植體，進(jìn)行無菌消毒處理；（2）將經(jīng)步驟（1）處理過的所述河北楊葉柄切成一定長度的小段并接種于培養(yǎng)基中形成愈傷組織；（3）將步驟（2）中形成的愈傷組織接種于培養(yǎng)基中誘導(dǎo)所述愈傷組織分化形成不定芽；（4）將步驟（3）中的所述不定芽接種于培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得生長健壯的組培苗。本發(fā)明以葉柄為外植體，取材方便、材料豐富、操作簡單，誘導(dǎo)的愈傷組織可分化大量不定芽，不定芽生根快且生根率高、植株再生過程中繁殖率高，河北楊高效組織培養(yǎng)再生體系的建立，為其工廠化育苗和遺傳改良研究奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于林業(yè)無性繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種以葉柄為外植體的河北楊組培快繁方法。

背景技術(shù)

河北楊（Populus hopeiensis）又名椴楊、青楊等，是楊柳科楊屬白楊派樹種。河北楊生長迅速、耐寒、耐旱、根深、側(cè)根發(fā)達(dá)、萌蘗力強(qiáng)，是水土保持、防風(fēng)固沙和綠化造林優(yōu)良樹種。目前，扦插繁殖是河北楊繁育中最常采用，但存在生根難，成活率低等問題，無法滿足對河北楊這一優(yōu)良樹種苗木的需求。河北楊組織培養(yǎng)的報道最早為1980年，林靜芳等以河北楊莖段、葉柄、葉片為外植體進(jìn)行了再生體系的初步研究，雖然獲得了完整植株并移栽成活，但是并沒有公布具體的培養(yǎng)方法和條件。之后的研究中均以莖段和葉片為外植體，再無以葉柄為外植體的研究報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是根據(jù)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種以葉柄為外植體的河北楊組培快繁方法，以河北楊葉柄為外植體，在1/2MS培養(yǎng)基附加不同濃度6-BA、NAA、IBA來進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)、愈傷組織分化、不定芽生根及組培苗擴(kuò)繁，實現(xiàn)河北楊高效再生體系的建立。

本發(fā)明目的實現(xiàn)由以下技術(shù)方案完成：

一種以葉柄為外植體的河北楊組培快繁方法，其特征在于：所述方法包括如下步驟：

（1）以河北楊葉柄為外植體，進(jìn)行無菌消毒處理；

（2）將經(jīng)步驟（1）處理過的所述河北楊葉柄切成一定長度的小段并接種于培養(yǎng)基中形成愈傷組織；

（3）將步驟（2）中形成的愈傷組織接種于培養(yǎng)基中誘導(dǎo)所述愈傷組織分化形成不定芽；

（4）將步驟（3）中的所述不定芽接種于培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得生長健壯的組培苗。

所述步驟（2）中的培養(yǎng)基的組分為：MS+6-BA0.3-1.0mg/L、NAA0.2-0.6mg/L、蔗糖30g/L、瓊脂6g/L，pH控制在5.8-6.0。

使用所述培養(yǎng)基在溫度為25±1℃的條件下暗培養(yǎng)使河北楊葉柄形成愈傷組織。

所述步驟（3）中的培養(yǎng)基的組分為：MS+6-BA0.3-1.0mg/L、NAA0.2-0.6mg/L、蔗糖30g/L、瓊脂6g/L，pH控制在5.8-6.0。

使用所述培養(yǎng)基在溫度為25±1℃，光照強(qiáng)度2500Lx，光照時間12h/d的條件下誘導(dǎo)愈傷組織分化形成不定芽。

所述步驟（4）中的培養(yǎng)基的組分為：1/2MS +IBA0.3-0.6mg/L、NAA0.05-0.1mg/L、蔗糖30g/L、瓊脂6g/L，pH控制在5.8-6.0。

使用所述培養(yǎng)基在溫度為25±1℃，光照強(qiáng)度2500Lx，光照時間12h/d的條件下培養(yǎng)不定芽。

所述步驟（2）中所述葉柄切成1cm小段。

本發(fā)明的優(yōu)點是：以葉柄為外植體，取材方便、材料豐富、操作簡單，誘導(dǎo)的愈傷組織可分化大量不定芽，不定芽生根快且生根率高、植株再生過程中繁殖率高，河北楊高效組織培養(yǎng)再生體系的建立，為其工廠化育苗和遺傳改良研究奠定了基礎(chǔ)。