[發明專利]用于檢測人ADD3和CDH23基因甲基化的引物探針組合物、試劑盒及檢測方法

有效

• 申請號: 202010053489.4
• 申請日: 2020-01-17
• 公開（公告）號: CN111154876B
• 公開（公告）日: 2023-01-20
• 發明（設計）人: 盛青松;朱桂春;姚魯帥;于垚垚
• 申請（專利權）人: 無錫市申瑞生物制品有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 蘇州友佳知識產權代理事務所(普通合伙) 32351
• 代理人: 儲振

1.一種用于檢測人ADD3和CDH23基因甲基化的引物探針組合物，其特征在于，包括：檢測人ADD3基因甲基化的第一特異性引物及第一特異性探針，檢測人CDH23基因甲基化的第二特異性引物及第二特異性探針，檢測內參基因β-actin的第三特異性引物及第三特異性探針；

所述第一特異性引物的正向引物如SEQ NO.1所示核苷酸序列，所述第一特異性引物的反向引物如SEQ NO.2所示核苷酸序列，所述第一特異性探針如SEQ NO.3所示核苷酸序列；

所述第二特異性引物的正向引物如SEQ NO.4所示核苷酸序列，所述第二特異性引物的反向引物如SEQ NO.5所示核苷酸序列，所述第二特異性探針如SEQ NO.6所示核苷酸序列；

所述第三特異性引物的正向引物如SEQ NO.7所示核苷酸序列，所述第三特異性引物的反向引物如SEQ NO.8所示核苷酸序列，所述第三特異性探針如SEQ NO.9所示核苷酸序列。

2.根據權利要求1所述的引物探針組合物，其特征在于，所述第一特異性探針與第二特異性探針的5’端標記有熒光報告基團，3’端標記有熒光淬滅基團；所述熒光報告基團選自FAM、HEX、TET、JOE、NED、VIC、CY3、CY5、ROX或TAMRA中的任意一種，所述熒光淬滅基團選自MGB、BHQ或Phosphorothioate中的任意一種。

3.一種用于檢測人ADD3和CDH23基因甲基化的試劑盒，其特征在于，包括采用如權利要求1或者2所述的引物探針組合物所組成的引物探針預混液，擴增預混液，陰性質控品及陽性質控品；

所述擴增預混液由PCR緩沖液、PCR保護劑、Taq酶、dNTPs、MgCl₂組成；

所述陽性質控品為亞硫酸氫鹽修飾的全甲基化人類基因組DNA；

所述陰性質控品為亞硫酸氫鹽修飾的非甲基化人類基因組DNA。